一株牛肠道病毒的分离与鉴定

• 作者: 向文杰 宋文凤 朱远茂 李德栋 林俊 薛飞 陈瑞红
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛肠道病毒 分离 鉴定 理化特性
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 34-39
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 4756字
• 语种: 中文

摘要

本研究从内蒙古某牛场患呼吸道病牛鼻拭子中分离到1株病毒,命名为NM575,并对其进行了鉴定.分离的病毒能够抵抗100 μg/mL的DNA 抑制剂 5-溴脱氧尿苷,确定为RNA病毒.电镜观察可见无囊膜球形的病毒粒子,直径约30 nm,与小RNA病毒形态学特征相符.理化特性鉴定结果表明分离病毒对乙醚、氯仿及胰酶具有一定抵抗力,耐酸,对热敏感,与牛肠道病毒特性相符.应用牛肠道病毒P1基因的特异性引物,通过RT-PCR可从病毒细胞培养物中扩增出特异性片段,对其进行序列测定并与GenBank中登录的牛肠道病毒参考毒株及其他种属的肠道病毒参考株相应的序列进行比对及系统进化分析,结果显示分离毒株NM575与牛肠道病毒BHV-261株的核苷酸同源率为80%,进一步说明分离株为牛肠道病毒,且基因分型为EV-F1.病毒的体外细胞培养嗜性试验结果显示,NM575株可感染牛、仓鼠、猪、犬和鸡等多种动物细胞,尤其在牛源细胞中复制滴度最高,为107.6TCID50/mL.综合以上结果分析确定所分离的病毒株NM575为牛肠道病毒,这是我国首次从患呼吸道病牛鼻拭子中分离获得.