摘要:
太湖猪(Susscrofa)作为我国著名的地方猪品种,具有繁殖力高、耐粗饲、抗病性好、肉质佳等诸多特点,是分子育种和基因组选择的重要遗传资源.本研究基于猪数量性状基因座(quantitative trait locus, QTL)数据库、基因本体(gene ontology,GO)、通路分析(ingenuity pathway analysis,IPA)数据库等生物信息学技术对猪生长性状相关基因进行挖掘,同时筛选出其与西方品种存在品种间差异的特异SNPs,通过基因相关性,SNP特异性,SNP位置等信息综合预测可以通过基因编辑改良太湖地方品种的位点,并对猪基因组单导链RNA(single guide RNA,sgRNA)进行脱靶分析,筛选出CRISPR/Cas9编辑的最优sgRNA,旨在为太湖地方猪生长性状研究提供准确真实的基因编辑位点.在猪基因组中,共检测到127 353 502个前间区序列邻近基序(protospacer adjacent motif,PAM)位点,平均每20 bp存在1个PAM位点,共观察到5种PAM类型,包括TGG、AGG、GGG、CGG和NGG,占比分别为34.52%,32.61%,26.43%,6.43%和0.0082%.最终得到猪生长性状候选基因428个,筛选得到太湖流域猪种二花脸、枫泾、嘉兴黑、米猪、中梅山、沙乌头、小梅山的生长相关特异SNPs数量分别为412、282、372、414、393、279、458个,并为每一个位点综合打分,最后依据脱靶分析,为6个品种的每个生长相关SNP位点分别提供4个最优的sgRNA.本研究为后续高效准确的基因编辑工作提供数据基础.