干扰MHR1对嗜热毁丝霉纤维素酶活性的影响

• 作者: 刘刚 来亚鹏 王娟 谢宁 邓婷婷 龚艳芬
• 来源期刊: 深圳大学学报（理工版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 嗜热真菌 嗜热毁丝霉 RNA干扰 纤维素酶 MHR1因子 生物质纤维素
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 15-21
• 页数: 7页
• 分类号: Q939.9
• 字数: 4927字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1249.2018.01015

摘要

利用RNA-Seq技术,筛选到潜在的负调控因子MHR1(fungal_TF_MHR1).为研究MHR1与纤维素酶基因表达之间的关联,设计基因mhr1的RNA干扰序列,并使用丙酮酸脱羧酶强启动子pdc成功构建mhr1基因的RNA干扰表达载体,经原生质体转化,获得一株干扰效率较高的阳性转化子MtR5.通过RT-qPCR、酶活测定和胞外蛋白浓度测定等分析发现,在诱导和非诱导培养条件下,转化子MtR5的胞外蛋白浓度、纤维素酶活性以及主要纤维素酶基因的表达量均高于野生型的.干扰转录因子MHR1可增加纤维素酶基因的表达量,研究表明,MHR1是一种与纤维素酶基因表达调控相关的转录因子.