利用单个B细胞分选方法获得HIV-1单克隆抗体基因及功能鉴定

• 作者: 任莉 侯佳利 李丹 梁华 王硕 邵一鸣 郝彦玲 鞠斌 魏民
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 单个B细胞分选 抗体基因 序列分析 结合能力 中和活性
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 481-487
• 页数: 7页
• 字数: 3351字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2018.07.001

摘要

目的 从人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)感染者中获得单克隆抗体基因及功能鉴定.方法 单细胞流式分选得到抗原特异性单个B细胞,基因扩增和测序得到抗体可变区序列,BioEdit软件包中Sequence Identity Matrix程序分析基因序列一致性,免疫遗传学数据库分析抗体基因家系和突变率,酶联免疫吸附试验测定抗体结合能力,TZM-bl/假病毒试验检测抗体中和能力.结果 从3个HIV-1感染者中分别获得了4个、7个和11个不同抗体的重链和轻链基因序列,其基因家系、CDR3长度和突变率广泛多样;验证了一个感染者的4个抗体基因序列,抗体A1和B3是HIV-1单克隆结合抗体,能同时与B亚型、CRF01 AE和CRF07 BC抗原蛋白结合;A1和B3也是HIV-1单克隆中和抗体,能够中和C亚型的MW965病毒,50％抑制浓度分别为0.04μg/ml和37.34μg/ml.结论 本研究成功获得了大量的单克隆抗体基因,并对其中的部分序列进行了功能验证,为单克隆抗体的分离和鉴定等研究工作提供了基础.