TFPR1通过激活树突状细胞并促进其成熟发挥佐剂功能

• 作者: 周育森 孙维来 宁秀哲 寇志华 朱青 李悄 王月鹏
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: TFPR1 树突状细胞 佐剂 作用机制
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 101-104
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 2392字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2018.02.005

摘要

目的 研究树突状细胞(DC)在重组蛋白TFPR1发挥佐剂功能中的作用.方法 在无菌条件下取4～5周龄雄性BALB/c小鼠的骨髓细胞,小鼠重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)与重组白介素4(rmIL-4)诱导分化6 d后,加入TFPR1共孵育24 h,并以LPS处理为阳性对照、PBS为阴性对照,普通光学显微镜观察DC形态变化,罗丹明标记鬼笔环肽(TRITC Phalloidin)和DAPI共染色后,激光共聚焦显微镜观察细胞肌动蛋白和细胞核的分布情况,流式细胞术检测细胞表面CD40、CD80、CD86、MHCⅡ的表达水平,ELISA检测细胞培养上清中的细胞因子.结果 在普通光镜和共聚焦显微镜下,加入TFPR1的DC与加入PBS的阴性对照DC相比具有显著的不同,而和加入LPS的阳性对照相似:光镜下发现大多数TFPR1处理的DC伪足变短直至消失,并变成圆形、悬浮于培养基中;激光共聚焦显微镜观察发现TFPR1处理的DC肌动蛋白由分布于细胞两极转至均匀分布于细胞膜上,从形态学上表明TFPR1可促进DC成熟;流式细胞术检测到TFPR1处理的DC表面CD40、CD80、CD86、MHCⅡ的表达量上调,进一步证明TFPR1具有促进DC成熟的作用.ELISA检测发现TFPR1处理的DC可产生高水平的IL-6、IL-8、TNF-α等细胞因子.结论 TFPR1不但能促进DC成熟,且能激活DC产生细胞因子,说明DC在TFPR1的佐剂功能中发挥重要作用.