牙鲆卵原细胞鉴定、分离及纯化的初步研究

• 作者: 于清海 任建功 任玉芹 周勤 姜秀凤 孙朝徽 宋立民 王玉芬 王青林
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 牙鲆 卵原细胞 鉴定 分离 纯化 vasa
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1510-1517
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2018.09.0103

摘要

为获得高比例和高教量的卵原细胞,采用酶组合消化和Percoll梯度离心法开展了不同月龄牙鲆卵原细胞分离纯化的研究.通过光学观察及Vasa蛋白在生殖细胞的定位对卵原细胞进行了鉴定区分.结果表明,所获卵巢单细胞悬液中,6月龄每毫克卵巢组织获得的卵原细胞量为(9.86±1.02)× 104个,显著高于18月龄和30月龄(P＜0.05).Percoll梯度离心后,卵原细胞主要分布于L-15与20％ Percoll梯度液间、20％～35％ Percoll梯度液间,其占比高达75％以上,显著高于纯化前卵原细胞占比(P＜0.05);且细胞存活率高达84％以上,与纯化前细胞存活率无显著性差异(P＞0.05).除18月龄外,6月龄和30月龄每毫克卵巢组织获得的卵原细胞量纯化前后均无显著性差异(P＞0.05).该文通过酶组合消化和Percoll梯度离心的方法对最适月龄-6月龄牙鲆卵原细胞进行分离纯化,最终可获得高比例、高数量和高活性的卵原细胞,为进一步开展牙鲆生殖细胞移植、基因修饰等研究提供了必备的细胞来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于清海		6	9	2.0	2.0
2	周勤		3	0	0.0	0.0
3	王青林		2	2	1.0	1.0
4	孙朝徽		1	0	0.0	0.0
5	宋立民		2	2	1.0	1.0
6	姜秀凤		2	0	0.0	0.0
7	任建功		1	0	0.0	0.0
8	王玉芬		1	0	0.0	0.0
9	任玉芹		2	21	1.0	2.0