重组腐败梭菌α毒素对兔的免疫效力分析

• 作者: 刘莹 印春生 姚文生 康凯 朱真 李启红 杜吉革 薛麒 陈小云
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 腐败梭菌α毒素 重组表达 毒力 抗原性
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1727-1734
• 页数: 8页
• 分类号: S855.1
• 字数: 6503字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.08.018

摘要

本研究旨在获得重组腐败梭菌α毒素,并评价其毒力及免疫原性.对已知的腐败梭菌a毒素编码基因进行优化设计,通过人工合成获得基因片段Gcsa.将Gcsa克隆至原核表达载体pET-30a(+)中进行表达与纯化,从而获得重组蛋白rCSA.利用Western blot方法检测纯化的rCSA与腐败梭菌α毒素抗血清的反应性,并采用犬肾细胞系(MDCK)和小鼠来检测rCSA的毒力.以甲醛脱毒后的rCSA与Montanide ISA 201佐剂以1∶1的比例制备疫苗,免疫家兔,按照《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测兔血清的中和抗体效价.结果表明,rCSA为可溶性表达,比例可达50％,且能与腐败梭菌抗血清反应.MDCK细胞毒性试验显示,0.15 ng· mL-1的rCSA即可引起明显的细胞病变;小鼠安全性试验显示,rCSA对ICR小鼠的最小致死量是1.5×106ng·kg-1;每毫升的一免抗血清可中和100～130个小鼠MLD的腐败梭菌毒素;每毫升的二免抗血清可中和360～480个小鼠MLD的腐败梭菌毒素;1个家兔MLD的腐败梭菌毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家免得到了4/4的保护.以上结果表明,rCSA具有良好的免疫原性,可作为腐败梭菌病基因工程亚单位疫苗的候选抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈小云		25	144	6.0	11.0
2	李启红		41	106	5.0	8.0
3	姚文生		38	164	5.0	12.0
4	康凯		46	153	6.0	10.0
5	印春生		30	127	5.0	11.0
6	杜吉革		11	6	2.0	2.0
7	薛麒		15	17	3.0	3.0
8	朱真		13	7	2.0	2.0
9	刘莹		5	4	2.0	2.0