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摘要:
为探讨乳腺癌细胞生长中凋亡抑制蛋白样蛋白2(ILP-2)对活性氧(ROS)毒性的拮抗作用,该研究用不同浓度双氧水(H2O2)对人乳腺癌细胞MCF-7进行氧化应激造模,2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐探针法(DCFH-DA)检测乳腺癌细胞中活性氧变化,蛋白质印记法检测siRNA干扰效率及干扰后乳腺癌细胞ILP-2的表达,噻唑蓝(MTT)法检测siRNA转染及双氧水处理后乳腺癌细胞的增殖活性,划痕试验分析siRNA转染及双氧水处理对乳腺癌细胞迁移的影响,吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色法(AO-EB)检测siRNA转染及双氧水处理对乳腺癌细胞凋亡的影响.结果显示,200 μmol/L双氧水显著诱导MCF-7中活性氧的产生.蛋白质印迹法结果显示,siRNA-5干扰效率较高;双氧水+siRNA-5组ILP-2表达高于双氧水+siRNA阴性对照组.双氧水处理细胞24、48和72 h后,MTT结果显示,细胞存活率明显低于空白对照组,双氧水+siRNA-5组细胞存活率高于双氧水+siRNA阴性对照组;划痕实验结果显示,细胞迁移率低于空白对照组,双氧水+siRNA-5组迁移率高于双氧水+siRNA阴性对照组;AO-EB结果显示,与空白对照组相比,双氧水组细胞凋亡率显著升高,双氧水+siRNA-5组细胞凋亡率低于双氧水+siRNA阴性对照组.以上结果表明,凋亡抑制蛋白ILP-2拮抗活性氧对乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒性,促进细胞增殖.
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真核表达质粒
真核细胞转染
乳腺癌细胞株
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文献信息
篇名 ILP-2表达上调减轻双氧水诱导的人MCF-7细胞株凋亡
来源期刊 中国细胞生物学学报 学科
关键词 凋亡抑制蛋白 活性氧 乳腺癌细胞
年,卷(期) 2018,(12) 所属期刊栏目 研究论文
研究方向 页码范围 2051-2058
页数 8页 分类号
字数 语种 中文
DOI 10.11844/cjcb.2018.12.0248
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中国细胞生物学学报
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