A型肉毒毒素鼠源中和单抗的制备与鉴定

• 作者: 付楚溪 张惟材 张秀娟 李磊 汪建华 熊向华
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 肉毒杆菌毒素,A型 抗体,单克隆 中和试验 杂交瘤
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 689-693
• 页数: 5页
• 分类号: R392
• 字数: 4307字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2018.09.010

摘要

目的 制备并鉴定A型肉毒毒素(BoNT/A)鼠源中和单克隆抗体.方法 利用BoNT/AHc抗原免疫小鼠筛选得到的55株杂交瘤细胞培养上清,通过小鼠中和实验(MNA)选出中和活性较高单抗,进行抗体分型并扩增抗体可变区基因;利用BALB/c小鼠制备腹水,通过辛酸-硫酸铵以及Protein-G亲和层析纯化,并进行ELISA、SDS-PAGE、Western印迹、截短实验、BIAcore、中和活性及中和剂量分析.结果 筛选得到1株中和活性较高的小鼠单抗BAS51,其轻链为κ、重链为IgG1,获得轻、重链可变区序列;小鼠腹水效价为7.29×105,纯化抗体纯度>95％;BAS51与抗原BoNT/AHC亲和力常数为1.53×109 L/mol,可与HCC片段结合,为线性表位,中和活性为100 LD50/mg,中和剂量为66.7 LD50/mg.结论 得到1株具有较强中和活性的抗BoNT/A小鼠源单抗,为A型肉毒毒素中和抗体的研发奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张秀娟	哈尔滨商业大学药学院	79	1059	17.0	29.0
2	李磊	哈尔滨商业大学药学院	2	1	1.0	1.0
6	付楚溪	军事科学院军事医学研究院生物工程研究所	3	1	1.0	1.0
10	汪建华	军事科学院军事医学研究院生物工程研究所	5	1	1.0	1.0
11	熊向华	军事科学院军事医学研究院生物工程研究所	5	1	1.0	1.0
12	张惟材	军事科学院军事医学研究院生物工程研究所	4	1	1.0	1.0