抗A型肉毒毒素鼠源性单克隆抗体的制备和鉴定

• 作者: 张惟材 景爱霞 毕波 汪建华 熊向华 赵巧林 陆璐
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 肉毒杆菌毒素,A型 重链 抗体,单克隆 中和抗体 突变体 表位
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 322-325
• 页数: 4页
• 分类号: R378.83|R996.1
• 字数: 4327字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2016.04.014

摘要

目的：制备与鉴定抗A型肉毒神经毒素重链C端（ heavy chain of botulinum neurotoxin serotype A， BoNT／AHc）特异性鼠单克隆抗体。方法通过纯化BoNT／AHc抗原、免疫BALB／c小鼠并建立杂交瘤细胞以制备鼠单抗，用ELISA、Western印迹实验和抗体分型试剂盒进行分析鉴定，并通过ELISA检测鼠单抗与BoNT／AHc突变体结合，初步鉴定其在BoNT／AHc的结合表位。结果得到纯度较高的BoNT／AHc抗原，制备了4株特异性鼠单抗1A4、3H3、3H7、5H8。间接ELISA结果显示，单抗细胞上清效价均＞3．0×103；Western印迹检测结果显示，单抗均能与BoNT／AHc特异性结合；抗体亚型鉴定结果为1A4、3H7属于IgG1（Κ），3H3属于IgM（Κ），而5H8属于IgG2b （Κ）；叠加ELISA实验表明，4株单抗抗原识别表位相近；用ELISA检测单抗与BoNT／AHc突变体结合实验结果初步确定了4株单抗与BoNT／AHc的结合表位。结论对抗A型肉毒毒素鼠源性抗体完成了制备和鉴定，为肉毒毒素中和抗体的开发与阐明中和抗体的表位奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊向华	军事医学科学院生物工程研究所	46	135	6.0	9.0
2	汪建华	军事医学科学院生物工程研究所	46	163	6.0	10.0
3	张惟材	军事医学科学院生物工程研究所	75	603	13.0	22.0
4	赵巧林	军事医学科学院生物工程研究所	3	2	1.0	1.0
5	陆璐	军事医学科学院生物工程研究所	2	2	1.0	1.0
6	毕波	军事医学科学院生物工程研究所	2	2	1.0	1.0
7	景爱霞	军事医学科学院生物工程研究所	1	2	1.0	1.0