谷氨酸诱导大鼠胃Cajal间质细胞自噬模型的建立

• 作者: 凌江红 宁海恩 张丽敏 张智 王远 谭人千
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 谷氨酸 Cajal间质细胞 自噬 微管相关蛋白1轻链3
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 1532-1536
• 页数: 5页
• 分类号: R33-33|R363
• 字数: 4148字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2018.08.029

摘要

目的:通过谷氨酸诱导离体大鼠胃Cajal间质细胞(ICCs)建立细胞自噬模型.方法:使用高、中和低浓度(分别为10 mmol/L、5 mmol/L和2.5 mmol/L)的谷氨酸作用于原代培养的ICCs不同时间(3 h、6 h和24 h),然后通过CCK-8法检测不同浓度谷氨酸对ICCs活力的影响;Western blot检测不同浓度谷氨酸在不同作用时点对ICCs自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达水平的影响;透射电镜观察谷氨酸干预后细胞内自噬体和超微结构的变化;免疫荧光检测谷氨酸诱导后自噬蛋白LC3的荧光表达.结果:与空白对照组相比,谷氨酸显著降低了大鼠胃ICCs活力(P<0.01).中、高浓度谷氨酸作用不同时间均可显著提高自噬蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值(P<0.01),其中以中浓度谷氨酸作用3 h的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值最高(P<0.01).透射电镜检测中浓度谷氨酸干预3 h发现,细胞内自噬体数量明显增加,线粒体和内质网数量及结构遭到破坏.免疫荧光结果提示,与空白对照组比较,谷氨酸中浓度组平均每个细胞内自噬蛋白LC3荧光表达显著增强(P<0.01).结论:应用谷氨酸可成功诱导大鼠胃ICCs自噬,谷氨酸的最佳诱导条件为5 mmol/L作用3 h.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	凌江红		65	619	14.0	21.0
3	张智		6	33	3.0	5.0
4	谭人千		4	1	1.0	1.0
5	宁海恩		2	7	1.0	2.0
6	张丽敏		6	13	2.0	3.0
7	王远		2	1	1.0	1.0