抑制自噬对艾塞那肽诱导的AR42J细胞凋亡的影响

• 作者: 余枭 余灿 朱卫东 朱红伟 李志强 李霞 韩铎 黄珲
• 来源期刊: 中华肝胆外科杂志
• 关键词: 艾塞那肽 胰腺腺泡细胞 凋亡 自噬抑制剂,3-MA
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 848-852
• 页数: 5页
• 字数: 3554字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-8118.2018.12.013

摘要

目的 探讨艾塞那肽对AR42J细胞株的损伤及其可能机制.方法 1、5、10 pmol/L艾塞那肽处理AR42J细胞株24、48、72、96、120 h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,筛选最佳浓度和时间作为后续实验条件.设置空白对照组(NC)、艾塞那肽组(Ex-4)和Ex-4+z-VAD-fmk组,检测艾塞那肽是否可直接导致AR42J细胞凋亡;设置NC组、Ex-4组、3-MA组和Ex-4+ 3-MA组,探究3-MA能否抑制艾塞那肽诱导的AR42J细胞凋亡.3-MA为自噬抑制剂,z-VAD-fmk为凋亡抑制剂.细胞活力检测采用MTT法.流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测caspase-3等凋亡相关蛋白以及微管相关蛋白轻链3(LC3)自噬相关蛋白表达.结果 以10 pmol/L艾塞那肽作用72 h为后续实验条件.z-VAD-fmk预处理可明显抑制艾塞那肽的细胞毒性,两组细胞活力为(49.4±3.0)％比(81.2±3.3)％,差异有统计学意义(P＜0.05).Ex-4组细胞凋亡率(28.2±1.4)％,高于NC组的(3.6±0.8)％,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot也显示caspase-3表达明显上调,而z-VAD-fmk预处理则可明显抑制艾塞那肽引起的细胞凋亡和caspase-3表达增加.3-MA预处理可明显抑制艾塞那肽的细胞毒性,处理72 h两组细胞活力为(49.8±2.5)％比(79.1±2.3)％,差异有统计学意义(P＜0.05).Ex-4组细胞凋亡率为(29.2±3.2)％,高于Ex-4+3-MA组的(14.5±2.1)％,差异有统计学意义(P＜0.05).Westernblot结果表明艾塞那肽可上调LC3B-Ⅱ、p62和caspase-3的表达,而3-MA预处理则可明显抑制艾塞那肽引起的LC3B-Ⅱ和caspase-3上调,但p62的表达却进一步上调.结论 艾塞那肽可诱导AR42J细胞凋亡,3-MA可通过抑制自噬而抑制艾塞那肽诱导的凋亡.使用3-MA可作为减轻艾塞那肽对胰腺腺泡细胞毒性的一种潜在方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余枭	中南大学湘雅三医院肝胆胰外科	35	191	7.0	13.0
2	朱卫东	湖南省岳阳市二人民医院肝胆胰外科	9	31	3.0	5.0
3	李霞	中南大学湘雅三医院内分泌科	94	801	14.0	25.0
4	余灿	中南大学湘雅三医院肝胆胰外科	12	21	3.0	4.0
5	朱红伟	中南大学湘雅三医院肝胆胰外科	10	23	3.0	4.0
6	黄珲	中南大学湘雅三医院肝胆胰外科	3	6	1.0	2.0
7	韩铎	中南大学湘雅三医院肝胆胰外科	3	2	1.0	1.0
8	李志强		1	1	1.0	1.0