改良碱裂解法和煮沸法提取金黄色葡萄球菌DNA效果的比较

• 作者: Dinsh Kumar K 吴亮 姜旭淦 王俊玲 许化溪 谢雨 邹治情 阴晴 陈思 陈盛霞
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 PCR检测 标本处理 DNA提取
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 经验技术交流
• 页码范围: 267-270
• 页数: 4页
• 分类号: R378.11
• 字数: 3215字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13312/j.issn.1671-7783.y180007

摘要

目的:建立一种简便经济的金黄色葡萄球菌基因组DNA提取方法.方法:选取10株耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌,预先以终浓度2 mg/mL溶菌酶处理6 h,再以改良碱裂解法提取细菌基因组DNA.同时以常规煮沸法制备上述细菌基因组DNA.采用PCR法扩增两种模板中金黄色葡萄球菌spa基因、mecA基因和femB基因,比较两种方法提取DNA的效果.结果:以改良碱裂解法制备DNA为模板,所有10株标本均可扩增出spa基因和mecA基因,4个标本扩增出femB基因;以直接煮沸法制备DNA为模板,仅1个标本扩增出spa基因,2个标本扩增出mecA基因,所有标本未扩增出femB基因.结论:改良碱裂解法提取基因组DNA效果优于直接煮沸法,所提取基因组DNA可以满足PCR扩增的要求.