乳腺癌细胞MDA-MB-231诱导破骨细胞成熟方法研究

• 作者: 王硕
• 来源期刊: 天津医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: M-CSF RANKL 破骨细胞 乳腺癌 炎症反应
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 205-208
• 页数: 4页
• 分类号: R737.9
• 字数: 3375字
• 语种: 中文

摘要

目的:探索乳腺癌细胞诱导小鼠骨髓源性破骨细胞成熟最佳条件.方法:采用贴壁分选法和贴壁前加入15 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)贴壁分选法分离得到小鼠骨髓单核细胞.两种分选方法得到的小鼠骨髓单核细胞用30 ng/mL M-CSF处理3d后,分别均分为两组,一组用50 ng/mL核因子κB受体活化因子配体(RANKL),30 ng/mL M-CSF和20％ MDA-MB-231细胞上清处理7d;另一组用50 ng/mL RANKL和30 ng/mL M-CSF处理2d后再用50 ng/mL RANKL,30 ng/mL M-CSF和20％MDA-MB-231细胞上清处理7d,TRAP染色,统计分析TRAP阳性细胞数和直径大小.结果:50 ng/mL RANKL,30 ng/mL M-CSF和20％ MDA-MB-231细胞条件培养基诱导,细胞发生炎症反应;50 ng/mL RANKL和30 ng/ml M-CSF处理2d后,50 ng/mLRANKL,30 ng/mL M-CSF和20％ MDA-MB-231细胞条件培养基能够诱导出成熟的破骨细胞;相比直接贴壁分选,贴壁前加入15 ng/mL M-CSF贴壁分选能够分选出更多具有活力的前体破骨细胞.结论:诱导破骨细胞分化最佳条件为:贴壁前加入15 ng/mL M-CSF处理24 h,30 ng/mL M-CSF处理3d后,用50 ng/mL RANKL和30 ng/mL M-CSF处理2d,再用50 ng/mLRANKL,30 ng/mL M-CSF和20％ MDA-MB-231细胞条件培养基诱导7d.