奶牛SREBP1蛋白对FASN基因启动子的转录调控分析

• 作者: 张菡 朱河水 杨国宇 樊晓娜 王月影 王林枫 王江 褚贝贝 韩立强
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 肝脏细胞 脂肪酸合成酶 固醇调节元件结合蛋白(1SREBP1)
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 652-659
• 页数: 8页
• 分类号: S852.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2018.04.012

摘要

脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)是动物组织合成脂肪酸的关键酶,为研究奶牛(Bos taurus)FASN基因的调控机制,本研究从奶牛基因组DNA中克隆构建了3个不同片段长度的FASN基因启动子并分析其结构,在L02肝脏细胞中转染固醇调节元件结合蛋白l(sterol regulatory element binding protein1,SREBP1)真核表达载体和FASN启动子,Western blot检测SREBP1核蛋白的表达,双荧光素酶系统和qRT-PCR技术研究对FASN基因启动子活性的调控作用,结果发现,构建的pGL3-FSAN1、pGL3-FASN2和pGL3-FASN3启动子片段长度分别为177、255和399 bp,其中pGL3-FASN2和pGL3-FASN3包含SREBP1转录因子结合位点.在人(Homo sapiens)源L02肝脏细胞中转染SREBP1质粒后检测发现,SREBP1核蛋白表达升高.肝脏细胞中转染pGL3-FSAN1、pGL3-FASN2和pGL3-FASN3启动子并用SREBP1质粒处理后,pGL3-FASN2和pGL3-FASN3启动子活性极显著增加(P＜0.01).与对照组相比,SREBP1处理后细胞FASN基因mRNA的表达显著增加1.67倍(P＜0.05).本研究揭示奶牛SREBP1蛋白可以促进对FASN基因的转录激活.这一结果为研究奶牛FASN基因的转录调控机制提供了基础资料.