CK18对沉默HIF-1α的人"三阴"乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响

• 作者: 师永红 杜华 海玲 赵静
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞角蛋白18 缺氧诱导因子-1α "三阴"乳腺癌 MDA-MB-231 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1451-1455
• 页数: 5页
• 分类号: R737.9
• 字数: 3549字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2018.12.009

摘要

目的 研究CK18对HIF-1α干扰后的人"三阴"乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响.方法 采用shRNA干扰技术沉默MDA-MB-231细胞中的HIF-1α 基因,选择RT-PCR及Western blot技术确定HIF-1α 干扰效果.构建真核表达载体CK18-PEGFP-C1,以脂质体转染法将其转染入HIF-1α 干扰后的MDA-MB-231细胞中,荧光显微镜下评估转染效率,Western blot检测CK18蛋白的表达情况.同时以空载体PEGFP-C1转染HIF-1α干扰后的MDA-MB-231细胞为阴性对照组.实验分别通过流式细胞术及Hoechst凋亡检测试剂盒检测CK18对细胞周期及凋亡的影响.结果 构建了CK18-PEGFP-C1真核表达载体,基因测序结果与GenBank报道的完全一致,并转染了封闭HIF-1α 基因的MDA-MB-231细胞,Western blot显示CK18蛋白表达上调.AnnexinⅤ-FITC/PI双染细胞凋亡检测分析CK18转染组早期凋亡率[(4.9±0.17)％]高于对照转染组[(3.09±0.25)％],差异有统计学意义(P<0.05).Hoechst染色试剂盒检测细胞凋亡显示CK18转染组的细胞凋亡率[(53±11)％]高于对照转染组[(21±13)％],差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建了CK18真核表达载体,并在HIF-1α干扰后的人"三阴"乳腺癌MDA-MB-231细胞中稳定表达后,可促进细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜华	内蒙古医科大学基础医学院	29	123	5.0	10.0
2	师永红	内蒙古医科大学基础医学院	26	140	7.0	11.0
3	赵静	内蒙古医科大学基础医学院	25	57	4.0	6.0
4	海玲	内蒙古医科大学基础医学院	12	16	2.0	3.0