IL-1β对人颞下颌关节滑液间充质干细胞生物学特性的影响

• 作者: 刘文静 孙养鹏 张弘 张志光
• 来源期刊: 口腔疾病防治
• 学科: 医学
• 关键词: IL-1β 颞下颌关节 滑液 间充质干细胞 成骨诱导 成脂诱导 成软骨诱导
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 288-296
• 页数: 9页
• 分类号: R782.6
• 字数: 6879字
• 语种: 中文
• DOI: 10.12016/j.issn.2096-1456.2018.05.003

摘要

目的 探讨白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)对人颞下颌关节滑液间充质干细胞(human synovial fluid mesenchymal stem cells,hSFMSCs)生物学特性的影响.方法 将临床收集的颞下颌关节紊乱病(temporomandibular disorder,TMD)患者颞下颌关节滑液的样本进行体外培养扩增获得hSFMSCs,将hSFMSCs分为3组:对照组用完全培养基(α-MEM细胞培养基+10％ FBS+1×GlutaMAX)常规培养(命名为0 ng/mL IL-1β组),IL-1β刺激组分别于完全培养基中加入rhIL-1β 1 ng/mL(1 ng/mL IL-1β组)和rhIL-1β 10 ng/mL(10 ng/mLIL-1β组),根据实验不同需求分组干预.通过细胞克隆形成率比较IL-1β对hSFMSCs接种后贴壁及增殖能力的差异,CCK8法检测IL-1β对hSFMSCs细胞增殖的影响,分别使用细胞周期检测试剂盒和Annexin V/PI凋亡检测试剂盒检测IL-1β对hSFMSCs的细胞周期和凋亡的影响.采用形态学和相关基因的定量检测评价IL-1β对hSFMSCs成骨诱导、成脂诱导、成软骨诱导等多向分化能力的影响.结果 不同浓度IL-1β刺激下对hSFM-SCs细胞克隆形成率(F=0.665,P=0.548)、细胞增殖(F=0.001,P=0.999)、细胞周期(FC1期=0.773,PC1期=0.503;Fs期=0.636,Ps期=0.562)和凋亡(F=0.196,P=0.827)的影响没有统计学意义.hSFMSCs成骨诱导中茜素红染色形成的矿化结节随IL-1β刺激浓度的增加逐渐较少,IL-1β刺激组Runt相关基因2(runt-related transcription factor2,RUNX2)和骨钙素(osteocalcin,OCN)的mRNA表达均显著低于0 ng/mL IL-1β组(P＜0.05);成脂诱导下随着IL-1β刺激浓度的增加,脂滴形成明显减少,实时荧光定量PCR检测显示成脂诱导下,与同期0ng/mL IL-1β组之间比较,IL-1β刺激组成脂分化的相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体G2 (peroxisomal proliferative receptor G2,PPARG2)和脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase,LPL)mRNA表达明显降低(P＜0.05).各浓度IL-1β介导成软骨诱导后虽然均形成软骨微球,但Sry基因相关HMG box-9 (sexdeter mining region Y related high-mobility group box-9,SOX9)和Ⅱ型胶原(collagenⅡ,COL-Ⅱ)基因的mRNA表达随着IL-1β的刺激而降低(P＜0.05),而基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP13)基因在IL-1β刺激下则mRNA表达明显增加(P＜0.05).结论IL-1β对hSFMSCs细胞生长增殖或凋亡无显著性影响,而直接影响其多向分化能力.