一株桑树内生拮抗菌的分离、鉴定及发酵条件优化

• 作者: 左伟东 徐伟芳 方翔 欧婷 牛娜 王飞 谢洁
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 桑椹菌核病 桑树内生菌 拮抗菌 发酵优化
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 2147-2160
• 页数: 14页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20180031

摘要

[目的]利用植物内生拮抗菌防治植物病害是一种有效的生物防治手段.本研究从健康桑树中分离筛选桑椹菌核病拮抗性内生细菌,为桑椹菌核病生物防治提供优良菌种.[方法]采用组织分离培养法及抑菌圈法分离、筛选桑椹菌核病拮抗性内生细菌;根据菌体形态、培养特征、生理生化特性及基于16S rDNA序列的系统发育分析,对抑菌活性显著且稳定的菌株进行菌种鉴定;进而利用菌丝生长速率法检测活性发酵液的抑菌谱与热稳定性,并通过单因素及正交试验优化该菌株产生抑菌活性物质的发酵条件.[结果]从健康桑树中共分离获得55株内生细菌,其中XP-27菌株对核盘菌PZ-2的抑菌活性稳定且拮抗效果明显;XP-27菌株形态、培养特征、生理生化特性与芽孢杆菌属相符,基于16S rDNA序列的系统发育分析结果显示该菌株与多株甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)的亲缘关系最近,且处于系统发育树的同一分枝,故将XP-27菌株鉴定为甲基营养型芽孢杆菌,命名为B.methylotrophicus XP-27;抑菌谱与热稳定性实验结果表明XP-27菌株对灰霉菌SWU5、腐霉菌SWU3等10种常见植物病原菌具不同程度的抑制作用,且其发酵滤液热稳定性强;发酵条件优化结果表明该菌株最佳培养基配方与培养条件为:牛肉膏1.00％,淀粉1.50％,K2HPO4 0.05％,MgSO4· 7H2O 0.10％,初始pH值为8.0,培养温度为30℃,接种量为7％,发酵时间为120 h.[结论]筛选获得的桑树内生细菌B.methylotrophicus XP-27对桑椹菌核病病原菌核盘菌PZ-2具有显著拮抗作用,可作为开发桑椹菌核病生防制剂的候选菌株.