氧化应激诱导视网膜色素上皮细胞中钙蛋白酶激活作用研究

• 作者: 刘晓娟 张乐 张坚 李雪颖
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 氧化应激 视网膜色素上皮细胞 钙蛋白酶
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 222-225
• 页数: 4页
• 分类号: R774
• 字数: 4633字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13389/j.cnki.rao.2018.0051

摘要

目的 观察一定浓度H2O2氧化应激体外培养人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞中钙蛋白酶(Calpain)含量及细胞活性改变.方法 常规培养商品化人RPE细胞系ARPE-19作为对照组,培养基内加入终浓度为10μmol·L-1及100μmol·L-1的H2O2作为实验组,培养4h、8h、16 h及32 h进行测定.MTT法测定不同浓度H2O2刺激下RPE细胞不同检测时间点细胞增殖率的变化;Fluo-3/AM、ester钙离子荧光探针标记细胞内钙离子,激光共聚焦显微镜及流式细胞仪检测RPE细胞内钙离子荧光值,间接观察钙离子浓度变化.10 μmol·L-1H2O2氧化刺激RPE细胞8h,用Western-Blot法及实时荧光定量PCR法检测细胞内Calpain蛋白及RNA含量的变化.结果 与对照组相比,10 μmol·L-1 H2O2刺激RPE细胞4h、8h、16 h及100 μmol·L-1H2O2刺激RPE细胞4h及8h后增殖率(r值)升高差异均具有显著统计学意义(均为P＜0.01).100μmol·L-1 H2O2刺激16 h及32 h细胞增殖率均较对照组下降(均为P＜0.01).10 μmol·L-1 H2O2刺激RPE细胞8h后胞内钙离子荧光强度(563.27±77.10)U较对照组(170.77±20.11)U显著升高(P＜0.01)、Calpain在mRNA和蛋白水平均较对照组显著升高(均为P＜0.05),而在同时使用Calpain抑制剂SNJ-1945(SNJ)的实验组这些变化可被有效抑制.结论 RPE细胞中钙超载激活Calpain参与H2O2氧化刺激RPE细胞的氧化应激改变.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张坚	陕西省人民医院眼科	31	86	5.0	7.0
2	张乐	陕西省人民医院眼科	15	44	4.0	5.0
3	刘晓娟	解放军四○一医院崂山分院眼科	4	17	2.0	4.0
4	李雪颖	陕西省人民医院眼科	6	20	3.0	4.0