Id1和Id3协同诱导结肠癌SW620细胞EMT并影响其侵袭与迁移

• 作者: 于悦 叶韵斌 孙艳霞 林万松 陈韡
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 分化抑制因子1基因 分化抑制因子3 上皮间质转化 结肠癌 SW620细胞 侵袭 迁移
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 987-993
• 页数: 7页
• 分类号: R730.23|R735.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2018.10.003

摘要

目的:探讨分化抑制因子1基因 (inhibitor of differentiation-1, Id1) 和Id3是否协同促进结肠癌SW620细胞EMT和细胞的侵袭迁移能力及其可能的机制.方法:利用慢病毒载体构建Idl和Id3单或双基因敲减的结肠癌SW620细胞, 实验分为4组:SW620-Sh-Id1组 (转染shRNA-Id1) 、SW620-Sh-Id3组 (转染shRNA-Id3) 、SW620-Sh-Id1-Id3组 (共转染shRNA-Id1和shRNAId3) 、SW620-NC组 (转染阴性空载慢病毒) .用qPCR法和Western blotting法分别检测敲减效果, 显微镜下观察稳定下调Idl和Id3后SW620细胞形态的变化, 划痕愈合实验和Transwell小室法检测SW620细胞迁移和侵袭的变化, Western blotting检测EMT标志分子及迁移、侵袭相关蛋白的表达.结果:成功构建了Idl和Id3单基因敲减与双基因敲减的结肠癌SW620细胞株. (1) Idl和Id3的敲除诱导SW620细胞形态由上皮样向间质样转变; (2) 与对照组相比, SW620-Sh-Id1组和SW620-Sh-Id3组SW620细胞侵袭和迁移的能力显著下降 (均P<0.05);SW620-Sh-Id1-Id3组细胞侵袭和迁移的能力较SW620-Sh-Id1组和SW620-Sh-Id3组也明显下降 (均P<0.05); (3) 与对照组相比, SW620-Sh-Id1组和SW620-Sh-Id3组β-catenin、snail1及MMP2蛋白表达降低, 上皮黏蛋白及TIMP2蛋白表达增高 (均P<0.05);SW620-Sh-Id1-Id3组与SW620-Sh-Id1组和SW620-Sh-Id3组相比, β-catenin、snail1及MMP2蛋白表达也下降, 同时上皮钙黏蛋白及TIMP2蛋白表达也增高 (均P<0.05) .结论:Id1和Id3可能通过诱导EMT协同影响结肠癌SW620细胞侵袭与迁移的能力.