痰瘀同治方对缺氧复氧诱导心肌细胞AMPK-mTOR自噬信号通路的影响及机制

• 作者: 周明眉 唐丹丽 张华敏 朱海燕 石晓雯
• 来源期刊: 中国中西医结合杂志
• 关键词: 痰瘀同治方 缺氧复氧 自噬 腺苷单磷酸活化蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 435-440
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7661/j.cjim.20180314.068

摘要

目的 研究痰瘀同治方对缺氧/复氧(H/R)心肌细胞自噬的影响及AMPK-mTOR信号通路在其中可能发挥的作用.方法 体外培养H9C2心肌细胞,随机分为空白对照组、H/R模型组(缺氧10h后复氧2h)、痰瘀同治方组、血府逐瘀汤组及栝蒌薤白半夏汤组,各组给予相应方剂肠吸收液18 mg/mL孵育2h后H/R处理.电镜下观察细胞自噬体结构,检测细胞上清液中LDH释放量和SOD活性,蛋白免疫印迹测定细胞内LC3、Beclin-1、P-AMPK和P-mTOR蛋白表达.结果 心肌细胞缺氧复氧后自噬体形成并增多.与空白对照组比较,H/R模型组心肌细胞LDH含量、LC3及Beclin-1蛋白表达量增加,p-AMPK表达增强,SOD活性下降且p-mTOR表达减弱(P ＜0.05,P＜0.01).与H/R模型组比较,各中药组干预后均能降低LDH、Beclin-1表达,痰瘀同治方组与血府逐瘀汤组可同时提高SOD活性,抑制LC3高表达(P ＜0.05,P＜0.01).同时痰瘀同治方组与血府逐瘀汤组可下调p-AMPK水平,并上调p-mTOR蛋白表达(P ＜0.05,P＜0.01).结论 缺氧复氧可激活心肌细胞AMPK-mTOR信号通路,从而诱导自噬过度表达加重心肌损伤,痰瘀同治方可通过调控AMPK-mTOR信号通路、抑制自噬而起到心肌保护作用.