芍药苷对高糖刺激的小鼠骨髓来源的巨噬细胞TLR4信号通路的影响

• 作者: 吴永贵 杨雯雯 段分分 王坤 邵云侠
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 芍药苷 巨噬细胞 Toll样受体4 炎症 糖尿病肾病
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1037-1044
• 页数: 8页
• 分类号: R364.5|R329.24|R587.24
• 字数: 5799字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.07.010

摘要

目的 探讨芍药苷( PF)对高糖刺激的小鼠骨髓来源的巨噬细胞( BMDMs) Toll 样受体4 ( TLR4)信号通路的影响.方法 分离骨髓来源的巨噬细胞作为研究对象,高糖作为刺激因素,芍药苷作为干预因素分组.将BMDMs分为7组:正常糖对照组( LG 组)、正常糖对照 +PF 组( LG +PF组)、高糖刺激组(HG组)、高糖刺激+PF组( HG+PF组)、TLR4 -/ -对照组(TLR4 -/-组)、TLR4 -/ -对照+高糖刺激组(TLR4 -/ -+ HG 组)、 TLR4 -/ -对照 + 高糖刺激 + PF 组(TLR4-/ -+HG+PF组).流式细胞术鉴定巨噬细胞的纯度及成熟度;CCK-8 检测 PF对 BMDMs活力的影响;Transwell检测各组BMDMs 的趋化功能;激光共聚焦法检测各组的TLR4和诱生型一氧化氮合酶( iNOS)的协同表达;qRT-PCR测定各组细胞中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β (IL-1β)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)及iNOS mRNA的转录表达;Western blot法检测各组总蛋白中iNOS、TLR4、髓样分化因子88( MyD88)、TIR结构域衔接蛋白( Trif)、磷酸化白介素-1受体相关激酶(p-IRAK1)、磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)、核因子κB(NF-κB)p65和NF-κBp-p65蛋白的表达;ELISA法检测各组细胞培养上清液中促炎因子TNF-α、IL-1β和MCP-1的分泌情况.结果 与LG组比较,高糖刺激可以增加巨噬细胞的趋化功能;明显上调细胞TNF-α、IL-1β、MCP-1及iNOS mRNA的转录表达(P＜0. 01);同时HG组的iNOS 及 TLR4、MyD88、Trif、p-IRF3、NF-κBp65 和 NF-κBp-p65等信号通路蛋白表达水平明显增强(P＜0. 01);细胞培养上清液中分泌的 TNF-α、 IL-1β 及 MCP-1 水平增高( P ＜0. 01). PF和敲除TLR4基因均可以抑制高糖刺激导致的巨噬细胞的激活效应.结论 高糖可以诱导BMDMs细胞内的TLR4及下游信号传导通路表达上调,同时使巨噬细胞激活导致促炎因子表达上调;PF和敲除TLR4基因均可抑制TLR4信号通路的激活,并且使巨噬细胞促炎因子的表达下调.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴永贵	安徽医科大学第一附属医院肾脏内科	135	874	15.0	22.0
2	王坤	安徽医科大学第一附属医院肾脏内科	36	177	8.0	11.0
3	邵云侠	安徽医科大学第一附属医院肾脏内科	10	45	4.0	5.0
4	段分分	安徽医科大学第一附属医院肾脏内科	2	5	2.0	2.0
5	杨雯雯	安徽医科大学第一附属医院肾脏内科	5	5	2.0	2.0