ABRO1基因敲除小鼠骨髓来源巨噬细胞的永生化及其LPS/TLR4通路活化的检测

• 作者: 尹荣华 张煊宜 杨晓明 詹轶群
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 生物学
• 关键词: ABRO1 小鼠,基因敲除 骨髓 巨噬细胞 永生化 细胞增殖 细胞凋亡 LPS/TLR4信号通路 Toll样受体4
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 249-253
• 页数: 5页
• 分类号: Q25
• 字数: 4294字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2018.04.002

摘要

目的 永生化ABRO1基因敲除(KO)小鼠骨髓来源的巨噬细胞系(BMDM),并确定缺失ABRO1对巨噬细胞LPS/TLR4通路活化的影响.方法 用pCDH-SV40LT-puro慢病毒分别感染野生型(WT)及ABRO1 KO小鼠的BMDM,连续传代培养>50代,得到永生化细胞系.利用MTS法和EdU掺入法检测细胞增殖,AnnexinⅤ/7-AAD双染色后用流式细胞仪检测细胞凋亡.脂多糖(LPS)刺激细胞后,Western印迹法检测NF-κB及MAPK信号通路,并用流式微球阵列(CBA)检测细胞产生IL-6、TNF-α的水平.结果 成功构建了ABRO1 WT和KO的永生化BMDM(iBMDM).正常培养下,WT及KO iBMDM细胞增殖能力和细胞凋亡均无明显差异,但撤除血清后,KO iBMDM细胞凋亡明显高于WT.LPS刺激后,NF-κB、MAPK信号通路激活及IL-6、TNF-α的产生无明显差异.结论 ABRO1缺失不影响LPS/TLR4信号通路.敲除ABRO1促进血清撤除诱导的iBMDM凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张煊宜	军事科学院军事医学研究院生命组学研究所	1	0	0.0	0.0
2	詹轶群	军事科学院军事医学研究院生命组学研究所	5	1	1.0	1.0
3	杨晓明	军事科学院军事医学研究院生命组学研究所	5	1	1.0	1.0
4	尹荣华	军事科学院军事医学研究院生命组学研究所	3	1	1.0	1.0