胡椒CBF1基因克隆与表达分析

• 作者: 伍宝朵 杨建峰 胡丽松 范睿 郝朝运
• 来源期刊: 西南农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 热引1号胡椒 石南藤 低温胁迫 CBF1基因
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源
• 页码范围: 2010-2015
• 页数: 6页
• 分类号: S573.9
• 字数: 4667字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16213/j.cnki.scjas.2018.10.004

摘要

[目的]克隆胡椒CBF1(C-repeat-binding factor1)基因,在低温耐受种质石南藤和低温敏感种质热引1号胡椒中,分析其组织表达模式和低温胁迫前后表达量差异,为胡椒抗寒分子机制研究提供基础.[方法]以胡椒组织总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增CBF1基因ORF,采用生物信息学软件分析CBF1基因编码蛋白特性和结构域,利用荧光定量PCR方法分析该基因的组织表达模式和低温胁迫条件下表达情况.[结果]在热引1号胡椒(低温敏感)和石南藤(低温耐受)中克隆出CBF1基因,分别命名为PnCBF1和PwCBF1.在2份种质中,该基因开放读码框长度分别为660和654 bp,预测蛋白质分子量分别为24.07和23.87kD,等电点PI为4.82.实时荧光定量PCR分析结果表明CBF1基因在石南藤的根组织中高量表达;CBF1基因在热引1号胡椒和石南藤中受低温诱导表达,且表达模式不同,低温胁迫各时期,CBF1基因石南藤的表达量都极显著高于热引1号胡椒.[结论]克隆获得PnCBF1和PwCBF1,其在热引1号胡椒和石南藤中都受低温诱导表达,在低温耐受种质石南藤中的表达量极显著高于低温敏感种质热引1号胡椒,且表达模式不同.本研究中胡椒CBF1基因的克隆和表达分析为胡椒CBF/DREB1低温调控途径研究和抗寒分子机制研究奠定了基础.