两株布鲁菌MLST新序列型(ST)的鉴定

• 作者: 华文浩 吕冰 吕燕宁 常建华 王全意 王慧珠 郭潇潇 陈丽娟 黎新宇
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 布鲁菌 多位点序列分型 序列型 基因分型
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 434-440,446
• 页数: 8页
• 分类号: R378
• 字数: 4818字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2018.00.059

摘要

目的 对北京地区分离自布病患者血液的2株布鲁菌进行多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)及其遗传学特征进行研究,为布病的预防和控制提供科学依据.方法 应用布鲁菌属特异性PCR(BCSP31-PCR)和种/型特异性PCR(AMOS-PCR)对分离的2株布鲁菌进行鉴定,采用MLST技术对2株布鲁菌分离株的19个管家基因、1个外膜蛋白基因及1个基因间区的序列进行测定,与MLST数据库中的等位基因序列进行比对,确定菌株的等位基因谱及9位点和21位点序列型(sequence type,ST).采用聚类分析法研究2株菌ST型与各种布鲁菌已知ST型的遗传进化关系.结果 2株分离株经BCSP31-PCR鉴定为布鲁菌属细菌,AMOS-PCR鉴定为非羊种、非牛种1、2、4型、非猪种1型、非绵羊附睾种布鲁菌;MLST分析显示,2株菌的等位基因编号(gap /aroA/glk /dnaK /gyrB /trpE/cobQ/int-hyp /omp 25/prpE/caiA/csdB/soxA/leuA/mviM/umC/fbaA/ddlA/putA/mutL /acnA)分别为2、1、2、2、1、3、1、4、1、13、2、2、2、2、1、1、3、7、6、2、3和2、1、2、2、1、3、1、4、29、13、2、2、2、2、1、1、3、7、6、2、3,比对MLST数据库,结果显示这2株细菌的等位基因编号组合未见报道,为新ST型.聚类分析显示这2种新的ST型与牛种布鲁菌ST型处于同一分支.结论 北京地区分离的2株布鲁菌为新ST型牛种布鲁菌,已被MLST数据库确认,分别命名为ST74和ST75(9位点序列型)与ST108和ST109(21位点序列型).与同属牛种布鲁菌的ST型遗传关系最近,该结果为北京地区布病的预防和控制提供了科学依据.