富血小板血浆对硝普钠诱导的软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响

• 作者: 吴剑 赵泉
• 来源期刊: 中医正骨
• 关键词: 富血小板血浆 骨关节炎 软骨细胞 硝普钠 Wnt信号通路 β连环素 糖原合成酶激酶3
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 4-7,12
• 页数: 5页
• 字数: 3592字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6015.2018.04.002

摘要

目的:观察富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对硝普钠诱导的软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法:取5月龄新西兰大白兔耳静脉血制成富血小板血浆.取兔双膝关节软骨,分离、培养软骨细胞.取培养的第2代软骨细胞,分为空白对照组、硝普钠对照组、PRP组和Wnt蛋白生成抑制剂2(the inhibitor of Wnt production-2,IWP-2)组,空白对照组与硝普钠对照组加入生理盐水、PRP组加入PRP、IWP-2组加入IWP-2干预1h后,除空白对照组外,其余3组再加入硝普钠干预24 h.采用实时荧光定量PCR法检测各组软骨细胞Wnt1、β-catenin和糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)mRNA的表达情况,采用Western-blot法检测各组软骨细胞Wnt1、β-catenin和GSK-3β蛋白表达情况.结果:经甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色,鉴定所培养细胞为软骨细胞.干预后,4组软骨细胞Wnt1、β-catenin和GSK-3β mRNA相对表达量组间总体比较,差异均有统计学意义(0.429±0.015,0.968±0.058,0.693±0.019,0.228±0.012,F=4.673,P=0.013;0.434±0.021,0.948±0.067,0.702±0.024,0.191±0.011,F =3.918,P =0.008;0.816 ±0.039,0.225±0.017,0.459 ±0.018,0.929±0.118,F=3.015,P=0.005).PRP组软骨细胞Wnt1、β-catenin mRNA相对表达量均较空白对照组和IWP-2组高(P =0.036,P=0.000;P=0.026,P=0.000),但均较硝普钠对照组低(P=0.017;P =0.013).PRP组软骨细胞GSK-3β mRNA相对表达量较空白对照组和IWP-2组低(P=0.001,P=0.000),但较硝普钠对照组高(P =0.016).干预后,4组软骨细胞Wnt1、β-catenin和GSK-3β蛋白相对表达量组间总体比较,差异均有统计学意义(0.565±0.017,0.941 ±0.134,0.725±0.031,0.251±0.013,F=5.062,P =0.017;0.526±0.024,0.872±0.016,0.653±0.016,0.262±0.018,F=3.592,P=0.006;0.753±0.014,0.262±0.015,0.579±0.024,0.823±0.025,F=2.384,P=0.002).PRP组软骨细胞Wnt1和β-catenin蛋白相对表达量较空白对照组和IWP-2组高(P=0.031,P=0.000;P =0.041,P=0.002),但低于硝普钠对照组(P =0.032,P=0.025);PRP组软骨细胞中GSK-3β蛋白相对表达量较空白对照组和IWP2组低(P=0.035,P=0.011),但高于硝普钠对照组(P=0.010).结论:PRP可抑制兔膝关节软骨细胞中Wnt1、β-catenin的表达,促进GSK-3β的表达.PRP可抑制硝普钠诱导的软骨细胞Wnt/β-catenin通路活性;但与Wnt蛋白生成抑制剂-2相比,PRP对软骨细胞Wnt/β-catenin通路活性的抑制作用较弱.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵泉		3	41	2.0	3.0
2	吴剑		5	39	2.0	5.0