烟草ERF基因NtRAP2-7的表达载体构建及表达模式分析

• 作者: 卓维 李立芹 杨尚谕 罗静 陈倩 鲁黎明
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草 NtRAP2-7基因 基因表达 非生物胁迫
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 页码范围: 104-111
• 页数: 8页
• 分类号: Q78|S572.03
• 字数: 5815字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2018.04.015

摘要

为了研究烟草NtRAP2-7基因在非生物胁迫响应中的功能,采用同源克隆的方法,在烟草品种K326中克隆到1个ERF转录因子基因NtRAP2-7.并利用生物信息学软件分析了该基因编码蛋白的理化性质、空间结构与系统进化关系.序列分析结果表明,该基因序列全长1398 bp,共编码465个氨基酸残基,预测蛋白的分子量为51.16 ku.该蛋白包含一个由3个β-折叠及1个α-螺旋组成的保守结构,并含有58个磷酸化位点.亚细胞定位预测表明,该蛋白主要定位于细胞核,并包含单分型的核定位信号序列.进化分析表明,NtRAP2-7蛋白与林烟草RAP2-7蛋白序列同源性最高,为98％.运用qRT-PCR技术进行了该基因的表达模式分析,组织表达分析发现,NtRAP2-7基因在烟草根、茎、叶、花中均有表达,但在根中的表达量最高.该基因的表达在低钾、高盐、干旱、ABA、H2 O2处理下受到诱导和在低温处理下受到抑制,结果表明,烟草NtRAP2-7基因参与了烟草的非生物胁迫应答反应.并利用双酶切法成功构建了pBI121-NtRAP2-7过表达载体,为今后该基因在非生物胁迫下的功能研究奠定了基础.