DJ-1蛋白调节核因子κB和MAPKs通路影响肝癌细胞存活的研究

• 作者: 刘丽娟 汪慧 胡和平 董立巍
• 来源期刊: 中国临床医生杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DJ-1蛋白 核因子κB MAPKs通路 肝癌
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 947-951
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3632字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-8552.2018.08.023

摘要

目的 研究DJ-1蛋白在肝细胞癌(HCC)组织中表达,并初步探索DJ-1蛋白在HCC细胞系中的生物学作用.方法 应用组织芯片技术、免疫组织化学(IHC)、实时定量PCR(RT-PCR)、蛋白免疫印记(Western Blotting)检测DJ-1蛋白在HCC癌组织及相应癌旁肝组织中的表达情况;通过HCC细胞系培养、慢病毒介导RNA干扰技术平板克隆、CC8细胞增殖检测实验进一步明确DJ-1蛋白在HCC细胞中功能.结果癌组织中的mRNA显著高于癌旁组织和正常肝组织,差异有显著性.对手术标本建立组织芯片进行DJ-1蛋白染色发现,DJ-1蛋白在癌组织中表达较高,DJ-1蛋白主要定位在细胞浆里;而在对应的癌旁组织中,也有一定水平的阳性染色区域.75％癌组织中呈高表达(90/120),而癌旁组织中DJ-1蛋白高低表达差异无显著性.应用慢病毒介导的shRNA感染癌细胞,显著抑制了DJ-1蛋白的表达.在正常培养的条件下DJ-1蛋白的干扰对LM3和SMMC7721细胞的生长无显著影响;剥夺培养基中的糖则对干扰细胞和对照细胞均有抑制细胞增殖作用.将培养基中的血清降低至3％时,干扰DJ-1蛋白的细胞增殖能力显著高于对照细胞.干扰DJ-1蛋白的细胞在低血清环境下具有较强的增殖和存活能力.采用肿瘤坏死因子α(TNFα)联合放线菌酮(CHX)刺激的对照细胞和干扰DJ-1蛋白的肝癌细胞,经单独TNFα处理的细胞未发生形态学变化,TNFα+CHX处理的细胞发生了形态学改变.取经TNFα+CHX处理的细胞裂解液,检测聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)水平,在对照细胞中剪切的PARP显著高于shDJ-1蛋白细胞.检测NF-κB和MAPKs信号通路中关键蛋白的磷酸化水平,p-p65、p-JNK、p-p38和p-ERK水平在干扰细胞显著高于对照细胞.结论 DJ-1蛋白在HCC癌组织中呈现高表达状态,DJ-1蛋白影响HCC细胞的增殖和对抗凋亡等生物学行为,影响HCC的进程. 提示DJ-1蛋白的缺失引起细胞核因子 κB和MAPKs信号通路的激活,特别是感受氧化应激的p38的活化更为显著,可以解释干扰DJ-1蛋白细胞在不良环境下更有存活优势的原因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡和平		3	5	2.0	2.0
2	刘丽娟		5	21	1.0	4.0
3	汪慧		2	1	1.0	1.0
4	董立巍		2	1	1.0	1.0