桩蛋白基因克隆及其在肝癌细胞Hep G2中的作用

• 作者: 孙达权 徐莹莹 石松 石静 薛殿婷
• 来源期刊: 新医学
• 关键词: 肝癌细胞 桩蛋白基因 真核表达 细胞迁移
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论著
• 页码范围: 671-675
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9802.2019.09.006

摘要

目的 克隆桩蛋白基因(PXN)的蛋白编码区并构建PXN基因真核表达载体,建立PXN稳转肝癌细胞株,分析PXN基因对肝癌细胞的作用.方法 Trizol法提取肝癌细胞总RNA并逆转录成cDNA,PCR法扩增PXN基因蛋白编码区并构建真核表达质粒pEBFP-PXN.脂质体法转染肝癌细胞Hep G2,G418筛选培养获得桩蛋白高表达稳转肝癌细胞株.实时无标记细胞分析检测细胞生长速率,细胞创伤-愈合实验分析细胞迁移速率.蛋白免疫印迹法检测细胞内蛋白表达变化.结果 成功克隆PXN基因并构建真核表达载体pEBFP-PXN.获得桩蛋白高表达单克隆稳转肝癌细胞株,胞内显示蓝色荧光,蛋白免疫印迹法显示稳转株内表达外源融合蛋白BFP-PXN.桩蛋白表达不影响Hep G2肝癌细胞的生长速率但可以抑制其细胞迁移,稳转细胞上皮标志蛋白E-Cadherin表达升高、间质标志物N-Cadherin和Vimentin表达下降.结论 PXN基因不影响Hep G2肝癌细胞生长增殖速率但可以抑制其细胞迁移,这可能与其可以影响肝癌细胞上皮-间质转化标志蛋白表达有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙达权	贵州医科大学基础医学院	15	11	1.0	2.0
2	石静	贵州医科大学基础医学院	2	1	1.0	1.0
3	石松	贵州医科大学基础医学院	6	1	1.0	1.0
4	薛殿婷	贵州医科大学基础医学院	4	0	0.0	0.0
5	徐莹莹	贵州医科大学基础医学院	3	0	0.0	0.0