雷公藤甲素对大鼠坐骨神经冷保存后细胞活性及 异体移植后神经再生的影响

• 作者: 冼华 张松 曾欢欢 李子健 汪一 黄英如
• 来源期刊: 中国康复理论与实践
• 学科: 医学
• 关键词: 异体神经移植 周围神经保存 冷保存损伤 雷公藤甲素 神经再生 坐骨神经 大鼠
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1271-1279
• 页数: 9页
• 分类号: R745
• 字数: 6096字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-9771.2018.11.006

摘要

目的 探讨雷公藤甲素(T10)对冷保存大鼠坐骨神经生物活性和异体移植后神经再生的影响.方法 取对数生长期施万细胞(SCs),CCK-8检测1×10-6 mol/L、1×10-7 mol/L、1×10-8 mol/L、1×10-9 mol/L T10溶液对SCs增殖的影响.取Sprague-Dawley大鼠双侧坐骨神经15 mm,分别在含0 mol/L、1×10-6 mol/L、1×10-7 mol/L、1×10-8 mol/L、1×10-9 mol/L T10的DMEM液中,4℃或37℃放置24 h(n=6),Western blotting检测神经生长因子(NGF)、神经胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达.另取大鼠坐骨神经15 mm,随机分成新鲜神经组(A组,n=30)、DMEM保存组(B组,n=30)、T10保存组(C组,n=30)、T10预处理后DMEM保存组(D组,n=30)、T10预处理后T10保存组(E组,n=30),4℃保存4周,Calcein-AM/PI双染激光共聚焦显微镜观察、流式细胞术检测神经活细胞、死细胞数,Western blotting检测主要组织相容性复合体-Ⅰ(MHC-Ⅰ)、MHC-Ⅱ、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达.用上述坐骨神经修复Wistar大鼠坐骨神经10 mm缺损(A′组、B′组、C′组、D′组、E′组,n=10),设立同系移植新鲜组(F′组,n=10).术后16周,电生理检测肌肉复合动作电位(CMAP)和运动神经传导速度(MNCV);取移植段神经,观察神经纤维数和神经超微结构.结果 SCs在浓度为1×10-9～1×10-7 mol/L T10溶液下,细胞增殖与对照组无显著性差异(P>0.05).各浓度T10溶液下,大鼠坐骨神经各神经营养因子表达均37℃明显高于4℃;相同温度时,1×10-8 mol/L组各神经营养因子表达均高于其他浓度组(P<0.05).大鼠坐骨神经冷保存4周后,与B、C、D组相比,E组神经活细胞数量多,MHC-I、MHC-II、ICAM-1表达降低(P<0.05).移植术后16周,E′组CMAP、MNCV、再生有髓神经纤维数量均优于A′、B′、C′、D′组(P<0.05),E′、F′组有髓神经纤维数量多,粗细均匀,分布广泛,髓鞘厚.结论 一定浓度T10体外能诱导大鼠坐骨神经神经营养因子表达,提高冷保存神经生物活性,降低免疫原性,促进异体移植后受体神经再生;冷保存前用一定浓度T10预处理效果更好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄英如	重庆医科大学中医药学院中医药防治代谢性疾病重庆市重点实验室	35	133	6.0	10.0
2	李子健	重庆医科大学中医药学院中医药防治代谢性疾病重庆市重点实验室	4	11	2.0	3.0
3	曾欢欢	重庆医科大学中医药学院中医药防治代谢性疾病重庆市重点实验室	4	11	2.0	3.0
4	汪一	重庆医科大学中医药学院中医药防治代谢性疾病重庆市重点实验室	2	3	1.0	1.0
5	张松	重庆医科大学中医药学院中医药防治代谢性疾病重庆市重点实验室	6	28	4.0	5.0