槲皮素诱导肿瘤细胞P53非依赖的G2/M周期阻滞和凋亡

• 作者: Sayantan CHATTERJEE 冯吉 卢国栋 周静 唐玥 戴惠淇 李忠杰 王梓萱 石欢 胡晓晓 邓敬桓 陈攀红 黄晓薇
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 槲皮素 细胞周期 细胞凋亡 肿瘤抑制蛋白P53 HepG2细胞 HCT116细胞 MDA-MA-231细胞
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 790-796
• 页数: 7页
• 分类号: R966
• 字数: 3927字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2018.10.007

摘要

目的 研究槲皮素对肿瘤细胞的增殖、周期和凋亡的影响.方法 用槲皮素12.5,25,50和100μmol·L-1,分别作用于人肝癌HepG2和Hep3B细胞、人乳腺癌MDA-MA-231细胞、人结肠癌HCT116 p53野生型(HCT116 p53WT)和p53敲除型(HCT116 p53KO)细胞12,24和48 h.荧光显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定细胞存活率;采用Hoechst33258染色观察细胞核染色质的变化;采用流式细胞术检测细胞周期的变化;Western印迹法检测胱天蛋白酶3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)蛋白水平的变化.结果槲皮素对肿瘤细胞增殖的抑制作用显著且呈浓度(rHepG2=0.972,P<0.01;rHep3B=0.959,P<0.01;rMDA-MB-231=0.979,P<0.01;rHCT116p53WT=0.983,P<0.01;rHCT116p53KO=0.980,P<0.01)和时间(rHepG2=0.974,P<0.01;rHep3B=0.956,P<0.01;rMDA-MB-231=0.959,P<0.01;rHCT116p53WT=0.971,P<0.01;rHCT116p53KO=0.988,P<0.01)依赖性,与细胞对照组相比,槲皮素处理组细胞数量明显减少.槲皮素诱导G2/M周期阻滞(P<0.01);镜下观察见核染色质浓缩和碎裂等典型的凋亡特性(P<0.01).Western印迹法结果显示,胱天蛋白酶3蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),活化的胱天蛋白酶3表达水平无显著变化,PARP表达水平明显降低(P<0.01),活化的PARP明显升高(P<0.01);在加入泛胱天蛋白酶抑制剂后,与槲皮素单独作用相比,胱天蛋白酶3和PARP蛋白表达水平升高,活化的PARP表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.05).结论 槲皮素能通过诱导P53非依赖性的G2/M细胞周期阻滞和细胞凋亡,从而实现对肿瘤细胞增殖的抑制作用.