摘要:
河南某规模化猪场,按照每年4次高致病性猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗免疫接种,2016年11月,妊娠后期母猪陆续产死胎.为确诊病因,采集死产胎儿肺脏组织,采用 RT-PCR 方法,扩增 PRRSV NSP2基因部分片段(根据产物片段大小,能区分高致病性与经典毒株)和 ORF5全长基因,结果显示,NSP2片段扩增大小约为418 bp,表明检测毒株是高致病性PRRSV 毒株;ORF5全长基因扩增结果,与预期大小片段一致.为分析猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫失败的原因,利用DNA Star软件,将检测毒株 ORF5基因序列与其他17种 PRRSV 毒株 ORF5基因序列构建遗传进化树,并对检测毒株与其他9种高致病性PRRSV毒株 ORF5基因推导的氨基酸序列进行分析、比较及GP5抗原性分析.结果显示,ORF5序列分析表明,检测毒株与2015年福建分离毒株 FJYR、河南分离毒株 TJbd14-2同源性最高,分别为97.2%和97.0%,与美洲型经典毒株VR-2332同源性为87.7%,与欧洲型毒株 Lelystad virus、NMEU09-1亲缘关系最远,分别为62.8%和62.6%;根据 ORF5 DNA 序列推导氨基酸序列分析表明,与其他9种高致病性PRRSV毒株相比,从病料中检测毒株的 GP5共有13个位置发生变异;GP5抗原指数分析表明,第30-40、51-63位抗原性,相比其他9种高致病性PRRSV毒株显著降低,据此推测这是导致免疫失败的根本原因,导致该猪场母猪流产的病原为一种变异的美洲型高致病性猪繁殖与呼吸综合征毒株.