肾元颗粒含药血清对高糖诱导人肾小管上皮-间充质细胞转分化中Klotho/FGFR1/FGF2信号途径的影响

• 作者: 万亚琴 王小琴 袁军 詹理睿 陈立
• 来源期刊: 中国中西医结合杂志
• 关键词: 肾元颗粒 肾小管上皮细胞 Klotho/FGFR1/FGF2信号转导途径
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1215-1221
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7661/j.cjim.20180314.066

摘要

目的 探讨高糖诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间充质细胞转分化过程中Klotho/FG-FR1/FGF2信号转导途径的表达及肾元颗粒含药血清的干预作用.方法 30只Wistar大鼠采用随机数字表法分为空白组、肾元颗粒组及厄贝沙坦组,每组10只,灌胃7天后门静脉取血.采用CCK-8法测定细胞增殖率以确定大鼠血清加入浓度,以LDH法检测含药血清对HK-2细胞的毒性作用.以高糖(30 mmol/L)诱导HK-2细胞上皮-间充质细胞转分化建立模型,分为正常组、模型组、高渗对照组、肾元颗粒组、厄贝沙坦组及ERK阻断剂组.免疫荧光检测Klotho及FGF2的表达,Western blot及RT-PCR检测Klotho、FGF2、E-Cadherin、α-SMA、FN、CollgenⅣ蛋白及mRNA表达水平,Western blot分析各组细胞ERK及磷酸化ERK(p-ERK)水平.结果 CCK-8法结果显示大鼠空白血清培养HK-2细胞最佳浓度为20％.LDH结果显示,与10％胎牛血清比较,肾元颗粒含药血清、厄贝沙坦含药血清对细胞LDH活性的影响差异无统计学意义(P＞0.05).与正常组比较,模型组Klotho、E-Cadherin蛋白及mRNA表达降低(P＜0.05),FGF2、α-SMA、FN、Collgen Ⅳ蛋白及mRNA表达增高(P＜0.05),p-ERK水平显著增高(P＜0.05).与模型组比较,肾元颗粒组Klotho、E-Cadherin蛋白及mRNA表达显著增高(P＜0.05),FGF2、α-SMA、FN、Collgen Ⅳ蛋白及mRNA表达显著降低(P＜0.05),p-ERK水平显著降低(P＜0.05).结论 肾元颗粒含药血清能改善高糖诱导的人肾小管上皮细胞转分化,其作用机制可能与调节Klotho/FGFR1/FGF2信号通路有关.