多柔比星体内外对心肌甲基化转移酶样3依赖的m6ARNA甲基化修饰的影响

• 作者: 孟祥雯 张波 张雪洁 李彩蓉 杨晓松
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 多柔比星 心肌毒性 氧化应激 RNA甲基化修饰
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 930-937
• 页数: 8页
• 分类号: R973
• 字数: 6162字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2018.12.004

摘要

目的 探讨多柔比星(DOX)诱导心肌损伤对甲基化转移酶样3(METTL3)的表达及其依赖的RNA N6甲基腺苷(m6)甲基化修饰水平的影响.方法 30只雄性SD大鼠隔天ip给予DOX 2 mg·kg-1,共7次;DOX 1μmol·L-1单独或与N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)0.5 mmol·L-1共同处理心肌细胞H9C224 h;HE染色观察大鼠心肌组织和心肌细胞形态变化,Masson染色检测大鼠心肌组织胶原纤维累积,免疫荧光、荧光定量PCR和Western蛋白印迹法分析大鼠心肌组织和心肌细胞H9C2中超氧化物歧化酶(SOD)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、叉头转录因子O3(Foxo3a)、活化的胱天蛋白酶3、METTL3和METTL14的表达;采用m6A RNA甲基化定量检测试剂盒分析大鼠心肌组织和H9C2细胞总m6A RNA甲基化修饰水平.结果 与正常对照组相比,DOX处理组大鼠心肌纤维排列紊乱,肌原纤维溶解严重且局部有炎症细胞浸润,心肌组织胶原纤维累积增加(P<0.05);心肌组织SOD,Foxo3a和Nrf2蛋白表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01),METTL3在mRNA及蛋白表达水平均上调(P<0.01),活化的胱天蛋白酶3表达水平显著增加(P<0.01),但METL14表达水平无显著变化.心肌细胞实验结果显示,与细胞对照组相比,DOX诱导心肌细胞H9C2中METTL3 mRNA和蛋白表达水平均上调(P<0.01),并存在时间依赖性(r=0.8211,P<0.05),而METTL14仅在mRNA水平表达上调(P<0.05),蛋白水平变化不显著;与DOX处理组相比,NAC能部分抑制DOX诱导的SOD,Nfr2和Foxo3a下调(P<0.05,P<0.01),METTL3和活化的胱天蛋白酶3上调(P<0.05,P<0.01).m6A RNA甲基化水平分析显示,DOX上调大鼠心肌组织总m6A RNA甲基化修饰水平(P<0.05),而NAC抑制DOX诱导的心肌细胞H9C2总m6A RNA甲基化修饰水平的上调(P<0.05).结论 METTL3依赖的m6A RNA甲基化修饰可能影响心肌内氧化还原动态平衡而介导DOX心肌毒性作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张波	湖北科技学院医药研究院糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室	19	40	4.0	5.0
3	孟祥雯	湖北科技学院医药研究院糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室	5	4	1.0	1.0
6	李彩蓉	湖北科技学院临床医学院	9	34	4.0	5.0
7	杨晓松	湖北科技学院医药研究院糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室	3	4	1.0	2.0
8	张雪洁	湖北科技学院医药研究院糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室	2	1	1.0	1.0