金丝桃素对小鼠巨噬细胞内刚地弓形虫速殖子的增殖抑制作用

• 作者: 夏惠 姜辉 孙希萌 崔洁 张敏 杨小迪 汪瑞 沈继龙 王守祥 王旗 陈兴智 魏明
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 金丝桃素 刚地弓形虫 巨噬细胞 抑制
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 583-587
• 页数: 5页
• 分类号: R382.5
• 字数: 3696字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2018.00.098

摘要

目的 观察金丝桃素(Hypericin,Hy)对小鼠巨噬细胞内弓形虫的增殖抑制作用,为抗弓形虫天然药物的筛选提供线索.方法 分离小鼠腹腔巨噬细胞(Macrophage,Mφ),建立体外Mφ感染稳定表达绿色荧光蛋白的弓形虫(RH-green fluorescent protein,RH-GFP)速殖子模型,观察不同剂量Hy的最佳作用效果.实验分4组:①A组(对照组),不加Hy;②B组(Mφ感染RH-GFP+100μg/mL Hy);③C组(Mφ感染RH-GFP+200μg/mL Hy);④D组(Mφ感染RH-GFP+400μg/mL Hy),分别在培养1、2和3 h后利用荧光显微镜和流式细胞术观察计数感染的Mφ和游离速殖子在各药物浓度及各时间点的变化;透射电镜观察虫体超微结构的变化.结果 与对照组相比,随着Hy浓度的增加和用药时间的延长,Mφ内速殖子数量明显减少,游离速殖子数量也显著减少,荧光强度逐渐降低;经药物组不同浓度Hy作用后,游离/Mφ内弓形虫的比值逐渐升高,至400μg/mL剂量作用3 h后开始下降,游离与胞内速殖子比例的差异在同一时间段内均有统计学意义(P<0.05),但药物作用1 h或2 h各实验组之间无统计学差异(P>0.05),作用3 h各浓度组之间差异有统计学意义(P<0.05),各实验组同一药物浓度下在孵育1、2和3 h后效果增强(P<0.05).透射电镜观察显示,随Hy作用时间延长,虫体逐渐出现肿胀,胞膜与基质之间空隙明显,空泡形成且增多、变大,胞膜断裂,内部结构溶解溢出.结论 体外实验初步显示Hy呈剂量和时间依赖性地增强对Mφ内弓形虫速殖子增殖的抑制作用,可降低宿主细胞感染率,且对胞外速殖子有一定杀伤作用.