抗CD19嵌合受体修饰的NK-92细胞的构建及其对CD19阳性非霍奇金淋巴瘤细胞的杀伤作用

• 作者: 刘秉宇 姜鑫 朱双阅 郑海丽
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 非霍奇金淋巴瘤 嵌合受体 CD19 NK-92 细胞毒性
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 767-771
• 页数: 5页
• 分类号: R730.5|R733.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2018.08.003

摘要

目的:构建表达CD19的二代CAR-NK-92细胞系,探讨其对CD19阳性非霍奇金淋巴瘤细胞的特异性杀伤作用.方法:构建表达CD19-CAR基因的载体并包装慢病毒颗粒,感染NK-92细胞,流式细胞术检测感染率,并进一步分选阳性细胞,Western blotting检测CD19-CAR在NK-92细胞中的表达;以CD19阴性骨髓瘤细胞U-266、CD19阳性的非霍奇金淋巴瘤细胞ARH-77和HS-Sultan细胞为靶细胞,以CD19CAR-NK-92为效应细胞,流式细胞术检测细胞杀伤实验中存活肿瘤细胞的绝对数量并计算杀伤率.结果:成功构建慢病毒载体pLVX-CD19-CAR并包装病毒颗粒,感染NK-92细胞后CD 19CAR-NK-92细胞纯度高于90％;Western blotting分析显示CD19-CAR已经成功表达在NK-92中.CD19CAR-NK-92对ARH-77[(70.10±1.86)％ vs (1.95±0.63)％,P＜0.01]和HS-Sultan[(74.98±1.60)％ vs (0.58±1.49)％,P＜0.01]细胞的杀伤率显著高于空载体对照组ZsGreen-NK-92细胞,对U266的杀伤率无显著差别(P＞0.05).结论:成功构建了表达CD19CAR的NK-92细胞系,其对CD19阳性的非霍奇金淋巴瘤细胞有特异性杀伤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘秉宇	浙江医院心内科	6	32	3.0	5.0
2	郑海丽	浙江大学医学院附属儿童医院药剂科	3	2	1.0	1.0
3	姜鑫	浙江大学医学院附属儿童医院药剂科	6	25	3.0	5.0
4	朱双阅	杭州市第七人民医院中西医结合科	2	2	1.0	1.0