小鼠肾小球分离方法比较及原代足细胞鉴定

• 作者: 吴鹤瑾 方际 王浩
• 来源期刊: 武警医学
• 学科: 医学
• 关键词: 肾小球 足细胞 原代培养 免疫磁珠
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1151-1154
• 页数: 4页
• 分类号: Q813.11|R322.61
• 字数: 2955字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3594.2018.12.012

摘要

目的 通过比较小鼠肾小球分离技术,明确小鼠原代足细胞培养的最优方法.方法 分别采用差异过筛法和免疫磁珠法分离C57/BL6 J小鼠肾小球,用Ⅳ型胶原酶消化去除包曼囊,用相差显微镜观察肾小球纯度和形态结构,采用免疫荧光染色和聚合酶链反应法(polymerase chain reaction,PCR)鉴定足细胞的标志蛋白Podocin的分布和表达.结果 差异过筛法获得肾小球纯度达90.2％±1.6％,一只C57/BL6J小鼠可以得到(10421±2421)个肾小球;视野中肾小球结构完整,可见肾小管碎片.免疫磁珠法获得的肾小球纯度达96.7％±1.2％,一只C57/BL6J小鼠可以得到(16112±2651)个肾小球;视野中肾小球结构完整,基本无肾小管.免疫磁珠法获得肾小球纯度和数目均高于差异过筛法,差异均有统计学意义(P<0.05).7～10 d可见肾小球周围大量多边形细胞爬出,呈铺路石样外观,符合足细胞特征;免疫荧光染色和PCR法均证实有足细胞特异性蛋白Podocin表达.结论 C57/BL6J小鼠肾小球的分离,免疫磁珠法明显优于差异过筛法,可以更简便、高效地培养出原代足细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王浩	上海中医药大学附属普陀医院肾内科	49	135	7.0	10.0
2	吴鹤瑾	上海中医药大学附属普陀医院肾内科	5	18	3.0	4.0
3	方际	上海中医药大学附属普陀医院肾内科	3	0	0.0	0.0