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摘要:
为建立菘蓝的遗传转化体系,获得转AtNDPK2基因的菘蓝植株,本试验以二倍体和四倍体菘蓝为试验材料,采用农杆菌介导的方法,将胁迫诱导型启动子SWPA2与AtNDPK2基因构建的共表达载体导入二倍体和四倍体菘蓝中,得到菘蓝稳定的遗传转化体系为:叶片切成约0.5 cm ×0.5 cm的小块,预培养2d后,取出放于OD600为0.6~0.8的农杆菌菌液中摇动15 min后取出.然后用灭过菌的滤纸吸干菘蓝叶片表面的农杆菌,共培养3d后将菘蓝叶片转入含25 mg·L-Kan和300 mg·L-1Cef筛选培养基中培养15 d,转接到含50 mg·L-Kan和300 mg·L-1Cef的筛选培养基中培养15 d.结果表明,二倍体抗性芽诱导率为8.84%,四倍体抗性芽诱导率为9.86%,将抗性芽切成单株,转接到加有50 mg·L-1Kan和300 mg·L-1 Cef的生根培养基上进行生根培养,20 d后每株能长出大约25条根,将生根良好的抗性植株移栽到栽培土中,成活率达到80%以上.通过PCR检测获得6个二倍体株系和7个四倍体株系,进一步通过RT-PCR检测发现,阳性株系均在转录水平表达.本研究为菘蓝基因工程操作技术提供了一定的参考,同时也为菘蓝抗逆品种的培育奠定了理论基础.
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文献信息
篇名 菘蓝遗传转化体系的建立及转AtNDPK2基因研究
来源期刊 核农学报 学科
关键词 菘蓝 AtNDPK2 转化 农杆菌介导
年,卷(期) 2018,(3) 所属期刊栏目 植物诱变育种·农业生物技术
研究方向 页码范围 455-462
页数 8页 分类号
字数 语种 中文
DOI 10.11869/j.issn.100-8551.2018.03.0455
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 殷奎德 85 484 11.0 15.0
2 王丽艳 128 561 12.0 17.0
3 郭永霞 87 463 10.0 18.0
4 荆瑞勇 70 373 10.0 15.0
5 孙强 28 153 7.0 11.0
传播情况
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菘蓝
AtNDPK2
转化
农杆菌介导
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期刊影响力
核农学报
月刊
1000-8551
11-2265/S
16开
北京市海淀区圆明园西路2号农产品加工研究所
1987
chi
出版文献量(篇)
4988
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