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菘蓝遗传转化体系的建立及转AtNDPK2基因研究
菘蓝遗传转化体系的建立及转AtNDPK2基因研究
作者:
孙强
殷奎德
王丽艳
荆瑞勇
郭永霞
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
菘蓝
AtNDPK2
转化
农杆菌介导
摘要:
为建立菘蓝的遗传转化体系,获得转AtNDPK2基因的菘蓝植株,本试验以二倍体和四倍体菘蓝为试验材料,采用农杆菌介导的方法,将胁迫诱导型启动子SWPA2与AtNDPK2基因构建的共表达载体导入二倍体和四倍体菘蓝中,得到菘蓝稳定的遗传转化体系为:叶片切成约0.5 cm ×0.5 cm的小块,预培养2d后,取出放于OD600为0.6~0.8的农杆菌菌液中摇动15 min后取出.然后用灭过菌的滤纸吸干菘蓝叶片表面的农杆菌,共培养3d后将菘蓝叶片转入含25 mg·L-Kan和300 mg·L-1Cef筛选培养基中培养15 d,转接到含50 mg·L-Kan和300 mg·L-1Cef的筛选培养基中培养15 d.结果表明,二倍体抗性芽诱导率为8.84%,四倍体抗性芽诱导率为9.86%,将抗性芽切成单株,转接到加有50 mg·L-1Kan和300 mg·L-1 Cef的生根培养基上进行生根培养,20 d后每株能长出大约25条根,将生根良好的抗性植株移栽到栽培土中,成活率达到80%以上.通过PCR检测获得6个二倍体株系和7个四倍体株系,进一步通过RT-PCR检测发现,阳性株系均在转录水平表达.本研究为菘蓝基因工程操作技术提供了一定的参考,同时也为菘蓝抗逆品种的培育奠定了理论基础.
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篇名
菘蓝遗传转化体系的建立及转AtNDPK2基因研究
来源期刊
核农学报
学科
关键词
菘蓝
AtNDPK2
转化
农杆菌介导
年,卷(期)
2018,(3)
所属期刊栏目
植物诱变育种·农业生物技术
研究方向
页码范围
455-462
页数
8页
分类号
字数
语种
中文
DOI
10.11869/j.issn.100-8551.2018.03.0455
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
殷奎德
85
484
11.0
15.0
2
王丽艳
128
561
12.0
17.0
3
郭永霞
87
463
10.0
18.0
4
荆瑞勇
70
373
10.0
15.0
5
孙强
28
153
7.0
11.0
传播情况
被引次数趋势
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引文网络
引文网络
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共引文献
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AtNDPK2
转化
农杆菌介导
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研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
核农学报
主办单位:
中国原子能农学会
中国农业科学院农产品加工研究所(前中国农业科学院原子能利用研究所)
出版周期:
月刊
ISSN:
1000-8551
CN:
11-2265/S
开本:
16开
出版地:
北京市海淀区圆明园西路2号农产品加工研究所
邮发代号:
创刊时间:
1987
语种:
chi
出版文献量(篇)
4988
总下载数(次)
6
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