胎牛血清和大鼠血清对体外软骨组织构建的影响

• 作者: 丁道芳 曹月龙 王上增 薛艳 贺自克 郑昱新
• 来源期刊: 上海中医药杂志
• 关键词: 胎牛血清 大鼠血清 软骨组织 染色 Ⅰ型胶原 Ⅱ型胶原
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 86-90
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16305/j.1007-1334.2018.04.024

摘要

目的 观察胎牛血清和大鼠血清对体外构建大鼠软骨组织的效应,为组织工程软骨筛选出合适的培养方法.方法 取大鼠原代软骨细胞,离心后,培养箱中放置48 h,细胞团块会自发形成软骨小结.分为胎牛血清组和大鼠血清组.每隔一天换一次液,连续培养2周.取出软骨组织,称量重量,固定于4％多聚甲醛,经过脱水、石蜡包埋、切片后,经HE(苏木素-伊红)染色,甲苯胺蓝和藏红-固绿染色及细胞免疫荧光检测Ⅱ型胶原(Col2a1)、Ⅰ型胶原(Col1a1)的表达.结果 胎牛血清组的软骨组织重量比大鼠血清组的软骨组织明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).HE染色结果表明:大鼠血清组的组织形态呈纤维样结构,而胎牛血清组组织形态呈典型的软骨结构.胎牛血清组的组织甲苯胺蓝和藏红染色明显,而大鼠血清组的组织甲苯胺蓝淡染,固绿深染,提示软骨组织退变或非软骨组织.进一步免疫荧光检测软骨标志基因Ⅱ型胶原和Ⅰ型胶原,胎牛血清组Ⅱ型胶原高表达,而大鼠血清组低表达,Ⅰ型胶原在两组的表达和Ⅱ型的表达呈相反的结果,即在大鼠血清组高表达,在胎牛血清组低表达.结论 胎牛血清可促进体外软骨组织的形成,而大鼠血清抑制了软骨组织形成.胎牛血清适合体外构建大鼠软骨组织.