益气解毒方通过MAPK/ERK信号通路抑制鼻咽癌细胞增殖

• 作者: 何迎春 周芳亮 徐冰雁 戴娜 罗晶婧 胡晶 范婧莹 蔺婷
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 益气解毒方 鼻咽癌 细胞增殖 MAPK/ERK信号通路
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 1221-1227
• 页数: 7页
• 语种: 中文

摘要

该文研究益气解毒方水提物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的抑制作用,并初步探讨其作用机制,为益气解毒方的临床应用提供新的理论依据.用不同质量浓度(0.125,0.25,0.5,1.0 g·L-1)的益气解毒方水提物、阳性对照药(顺铂,4.0 mg·L-1)、抑制剂PD98059(50 μmol·L-1)、激活剂isoproterenol hydrochloride(ISO,20 μmol·L-1)、激活剂ISO+益气解毒方水提物0.5 g·L-1处理CNE2细胞,使用实时无标记细胞功能分析仪(RTCA)和CCK-8法检测细胞增殖活性,并计算出半数抑制浓度(IC50),用荧光双染流式细胞仪PI染色检测药物作用后细胞周期分布情况;Westem blot法检测周期相关蛋白和MAPK/ERK信号通路相关蛋白的表达水平.RTCA和CCK-8法检测结果显示,与正常培养组比较,益气解毒方水提物能够有效抑制CNE2细胞增殖(P＜0.01),呈剂量和时间依赖性,48 h IC50为0.5 g·L-1;细胞周期结果显示,水提物处理48 h后,G0/G1期比例降低,G2/M期比例增加,阻滞细胞周期于G2/M期(P ＜0.01);Western blot实验结果显示,经过不同浓度水提物处理48 h后,细胞周期相关蛋白cyclinD1,cyclinD3,CDK2表达下调,MAPK/ERK信号通路相关蛋白p-c-Raf,p-MEK,p-ERK1/2表达明显下调,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05);在此基础上,加入MAPK/ERK信号通路的激活剂和抑制剂,结果显示,加入激活剂ISO,细胞增殖明显高于正常培养组,周期相关蛋白cyclinD1,cyclinD3,CDK2表达量均提高,同时,该信号通路关键蛋白p-c-Raf,p-MEK,p-ERK1/2的表达量也相对上升;而加入抑制剂PD98059后,细胞增殖明显低于正常培养组,相应蛋白的表达量亦降低,与对照组相比差异明显(P＜0.05).益气解毒方水提物主要通过下调MAPK/ERK信号通路关键蛋白p-c-Raf,p-MEK,p-ERK1/2的表达,阻滞细胞周期,抑制CNE2细胞增殖.