高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

• 作者: 孙国强 李永锋 高许雷
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 基因连续缺失片段 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 75-78
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 2553字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2018.11.020

摘要

为建立一种准确检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的方法,通过对PRRSV基因连续缺失片段dNsp2 (87)进行诱导表达,重组pUC57-dNsp2蛋白,经镍柱纯化后,作为抗原包被微量反应板,建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法.经反应条件优化,确定抗原的最适包被浓度为40 μg/mL,最适封闭液为5％脱脂奶粉,检测血清稀释度为1:40,酶标二抗的最适工作浓度为1:5 000,最佳显色时间为1h,确定阴阳性临界值为0.35 (OD450).该方法均不与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒(PCV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪伪狂犬病毒(PRV)阳性血清发生交叉反应,具有良好的特异性.与IDEXX PRRSVKit进行重复性、敏感性、符合性试验,证明该方法具有较好的重复性、敏感性、符合性.结果表明,该方法可用于临床PRRSV抗体的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙国强		94	597	13.0	19.0
2	高许雷		12	35	3.0	5.0
3	李永锋	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	5	17	2.0	4.0