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摘要:
目的:通过克隆环状RNA hsa_circ 0000254,构建过表达载体并初步鉴定其表达水平,为进一步的功能研究奠定基础.方法:人工合成hsa_circ_0000254的524 bp序列,用pGH克隆载体合成基因,然后酶切目的片段,连接到慢病毒过表达载体pLCDH-ciR中,测序验证.筛选阳性克隆,分别以pLCDH-circ254(C254)、NC(pLCDH-ciR)转柒293T细胞,培养40 h后收集细胞进行PCR检测及产物测序验证.结果:pLCDH-circ254表达载体经测序验证,测序峰图正常,且无杂峰或叠带,序列对比吻合,表明hsa_circ_0000254成功插入环状RNA表达载体pLCDH-ciR,过表达载体构建成功,表达效率高达1万倍.结论:成功构建hsa_circ_ 0000254表达载体,可高效表达hsa_circ_0000254.
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文献信息
篇名 急性髓系白血病(AML)中hsa_circ_0000254的实验研究
来源期刊 中国实验血液学杂志 学科 医学
关键词 急性髓系白血病 环状RNA hsa_circ_0000254 pLCDH-ciR载体 载体构建
年,卷(期) 2018,(3) 所属期刊栏目 白血病基础与临床
研究方向 页码范围 647-652
页数 6页 分类号 R733.71
字数 2850字 语种 中文
DOI 10.7534/j.issn.1009-2137.2018.03.003
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 钱煦岱 浙江省中医院检验科 12 139 5.0 11.0
2 孙涛 浙江大学医学院附属第二医院输血科 18 254 8.0 15.0
3 俞石芳 浙江大学医学院附属第二医院输血科 4 2 1.0 1.0
4 李晓芳 浙江省中医院检验科 5 6 2.0 2.0
5 李强 浙江省中医院检验科 3 5 2.0 2.0
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研究主题发展历程
节点文献
急性髓系白血病
环状RNA
hsa_circ_0000254
pLCDH-ciR载体
载体构建
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国实验血液学杂志
双月刊
1009-2137
11-4423/R
大16开
北京太平路27号
2-389
1993
chi
出版文献量(篇)
6154
总下载数(次)
16
总被引数(次)
34135
论文1v1指导