干扰维生素D3上调蛋白1通过调控Shh影响高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡

• 作者: 刘伦志 向海燕 张明霞 谭千林
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 维生素D3上调蛋白1 肾小管上皮细胞 糖尿病肾病 凋亡 Shh信号通路
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1968-1975
• 页数: 8页
• 分类号: R587.2|R363.2
• 字数: 5139字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2018.11.008

摘要

目的:探讨维生素D3上调蛋白1(VDUP-1)对高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响及机制.方法:人近端肾小管上皮HK-2细胞用高糖处理后,real-time PCR和Western blot检测细胞中VDUP-1的水平.HK-2细胞转染VDUP-1小干扰RNA,real-time PCR和Western blot检测抑制效果.高糖条件培养VDUP-1表达下调的HK-2细胞,流式细胞术检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞中caspase-3和caspase-9的活性,ELISA法测定培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,Western blot检测细胞中音猬因子(Shh)信号通路关键蛋白Patched 1(Ptch1)、Smoothened(Smo)、锌指蛋白Gli2和Shh的水平.用外源性Shh处理HK-2细胞,Western blot检测Ptch1、Smo和Gli2的水平.用外源性Shh处理VDUP-1表达下调的HK-2细胞,高糖处理后,流式细胞术检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞中caspase-3和caspase-9的活性,ELISA法测定培养液上清中TNF-α含量.结果:高糖处理后,HK-2细胞中VDUP-1的mRNA和蛋白水平升高(P<0.05).转染VDUP-1小干扰RNA后,HK-2细胞中VDUP-1的mRNA和蛋白水平下降(P<0.05).与正常培养的细胞相比,高糖处理后HK-2细胞凋亡率显著升高,细胞中caspase-3和caspase-9活性明显升高,TNF-α含量亦明显升高(P<0.05);下调VDUP-1表达后的HK-2细胞经高糖处理后细胞凋亡率显著降低,细胞中caspase-3和caspase-9活性也明显降低(P<0.05).高糖培养后细胞中Ptch1、Smo、Gli2和Shh的蛋白水平下降,而下调VDUP-1表达部分拮抗高糖对HK-2细胞中Ptch1、Smo、Gli2和Shh表达的影响.外源性Shh可以促进细胞中Ptch1、Smo和Gli2的表达,抑制高糖诱导的HK-2细胞凋亡和分泌TNF-α,与下调VDUP-1共同抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡.结论:干扰VDUP-1表达可能通过激活Shh信号通路抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡和分泌TNF-α.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘伦志	湖北民族学院附属民大医院肾内科	28	186	7.0	13.0
2	张明霞	湖北民族学院附属民大医院肾内科	24	209	8.0	14.0
3	向海燕	湖北民族学院附属民大医院肾内科	5	4	2.0	2.0
4	谭千林	湖北民族学院附属民大医院肾内科	2	21	2.0	2.0