苹果生长素响应因子MdARF5的克隆与功能鉴定

• 作者: 安建平 宋来庆 王小非 由春香 赵玲玲 郝玉金
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 苹果 生长素 ARF转录因子 花青苷
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 园艺
• 页码范围: 1345-1352
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2018.07.012

摘要

[目的]分离苹果生长素响应因子MdARF5(Auxin Response Factor 5),分析其对生长素的响应,鉴定其在调节花青苷合成过程中的作用,揭示MdARF5的生物学功能,为进一步研究生长素对花青苷的调节提供理论依据.[方法]以'嘎拉'苹果(Malus×domestica'Royal Gala')为材料,利用同源克隆技术,克隆得到一个ARF(Auxin Response Factor)转录因子,并将其命名为MdARF5.利用MEGA5.0软件构建多物种间系统进化树.通过农杆菌介导的遗传转化获得转基因苹果愈伤组织.比较野生型和转基因苹果愈伤组织花青苷积累的差异.利用烟草叶片瞬时转化试验,分析MdARF5对MdMYB1的转录调控.[结果]克隆获得苹果生长素响应因子MdARF5(序列号:MDP0000143749),该基因CDS为2691 bp,编码含有896个氨基酸的蛋白.系统进化树分析表明,苹果MdARF5与梨PbARF5同源性最高.基因表达分析显示,该基因响应生长素处理,并且与花青苷合成相关基因表现出相反的表达模式.在苹果愈伤组织中超表达MdARF5,其花青苷积累较野生型显著降低,表明MdARF5在调控花青苷积累过程中发挥重要作用.对苹果MdMYB1启动子序列进行分析,发现其序列包含一个MdARF5的结合位点.烟草瞬时表达试验显示,MdARF5能够抑制MdMYB1的表达.[结论]推测苹果MdARF5可能通过直接抑制MdMYB1的表达负调节花青苷的积累.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋来庆		47	191	8.0	11.0
2	赵玲玲		41	137	7.0	8.0