FLOT1基因小干扰RNA联合姜黄素在体外诱导肾癌细胞凋亡的机制

• 作者: 兰东阳 冯子煜 刘秉乾 姚文诚 李帅 杨锦建 武玉东 贾占奎 顾朝辉
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 肾癌 FLOT1基因 姜黄素 脱噬作用 信号转导与转录激活因子-3信号通路
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1908-1911
• 页数: 4页
• 字数: 3726字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2018.10.039

摘要

目的 探讨FLOT1基因小干扰RNA(siRNA)联合姜黄素对肾癌细胞凋亡的影响及其机制.方法 以LipofectamineTM 2000为载体,将FLOTl-siRNA转染人肾癌786-0细胞,Western blot检测转染siRNA后的细胞中FLOT1的蛋白表达.后续研究分FLOT1-siRNA组、姜黄素组和FLOT1-siRNA+姜黄素组进行细胞干预,并设置空白对照组,细胞计数试剂盒(CCK-8)及流式细胞仪分别检测4组细胞活力及凋亡率;H2 DCFHDA探针检测4组细胞ROS含量;Western blot检测4组细胞磷酸化信号转导与转录激活因子-3(p-STAT3)及信号转导与转录激活因子-3(STAT3)信号通路下游增殖细胞核抗原(PCNA)和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)的蛋白表达.结果 FLOT1-siRNA转染786-0细胞后FLOT1的表达(0.087±0.010)明显受到抑制,与空白对照组(0.454±0.038)比较差异有统计学意义(t=16.177,P=0.000).si-FLOT1 (0.491±0.053)或姜黄素(0.542±0.058)均可抑制786-0细胞活力,诱导786-0细胞凋亡(18.22±1.07)％、(12.39±0.86)％及ROS产生(189.5±8.2)、(147.7±7.1),下调p-STAT3(0.118±0.014)、(0.110±0.012)和PCNA(0.229±0.025)、(0.302±0.034)表达,上调bax(0.206±0.021)、(0.123±0.014)表达,与NC组比较差异均有统计学意义(0.792±0.065)、(1.62±0.25)％、(57.7±3.5)、(0.202±0.023)、(0.577±0.049)、(0.069±0.010)(t=6.736、7.378、12.796、10.112、7.186、2.832,P=0.000、0.000、0.000、0.000、0.000、0.022),联合使用si-FLOT1和姜黄素对786-0细胞活力(0.378±0.044)抑制、细胞凋亡(24.18±1.22)％及ROS产生(249.3±9.4)诱导、p-STAT3(0.054±0.008)和PCNA表达(0.135±0.016)下调及bax表达(0.411±0.038)上调作用更明显,且与单一的si-FLOT1或姜黄素比较差异均有统计学意义(t=5.132、4.491、3.456、6.140、10.752、15.106,P=0.001、0.002、0.009、0.000、0.000、0.000).结论 FLOT1 siRNA或姜黄素均可抑制肾癌细胞活力,诱导细胞凋亡,两者合用对细胞活力及凋亡作用更明显,机制可能与细胞内ROS提高及抑制STAT3信号有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨锦建	郑州大学第一附属医院泌尿外科	109	276	7.0	13.0
2	贾占奎	郑州大学第一附属医院泌尿外科	75	144	6.0	10.0
3	顾朝辉	郑州大学第一附属医院泌尿外科	41	55	5.0	6.0
4	刘秉乾	郑州大学第一附属医院泌尿外科	30	115	5.0	8.0
5	李帅	郑州大学第一附属医院泌尿外科	33	68	5.0	6.0
6	冯子煜	郑州大学第一附属医院泌尿外科	6	5	1.0	2.0
7	姚文诚	郑州大学第一附属医院泌尿外科	5	2	1.0	1.0
8	兰东阳	郑州大学第一附属医院泌尿外科	1	1	1.0	1.0