兽用生物制品中支原体污染PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 万玉林 刘学荣 崔治亮 葛玉凤 高广仁
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 兽用生物制品 支原体 污染 PCR 检测方法
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 动物保健品研究
• 页码范围: 163-166
• 页数: 4页
• 分类号: S859
• 语种: 中文
• DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2017.12.0345

摘要

为建立一种快速检测兽用生物制品中支原体污染的方法, 试验根据GenBank上登录的支原体16S rRNA种属保守区序列设计1对引物, 经PCR条件优化, 建立了检测兽用生物制品中支原体污染的PCR方法.结果表明:该方法对大肠杆菌、沙门氏杆菌、巴氏杆菌、猪链球菌、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、新城疫病毒的扩增结果均为阴性;对鸡毒支原体、猪肺炎支原体、禽滑液支原体基因组DNA的检测灵敏度分别达到0.13, 0.88, 0.14 ng, 与培养法的符合率达98.84％;应用该方法对鸡胚、血清、细胞等140份临床样品进行支原体污染的检测, 阳性污染率达6.43％.表明PCR方法检测具有良好的特异性、敏感性、准确性和适用性, 可用于兽用生物制品生产中鸡胚、血清、细胞、疫苗半成品等的质量控制和疫苗的质量检验.