罗汉果角鲨烯环氧酶基因的克隆及表达分析

• 作者: 唐其 赵欢 郭兰萍 郭娟 马小军 黄璐琦
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 罗汉果 角鲨烯环氧酶 表达分析 分子对接
• 年，卷（期）: 2018,（16）
• 所属期刊栏目: 分子生药学
• 页码范围: 3255-3262
• 页数: 8页
• 语种: 中文

摘要

罗汉果Siraitia grosvenorii属于葫芦科藤本植物,可作食药两用,其主要活性成分和甜味物质同为葫芦烷型四环三萜类甜苷物质.角鲨烯环氧酶(squalene epoxidase)被认为是三萜和植物甾醇合成中共有的限速酶,催化生成共同前体2,3-环氧角鲨烯;然而在甜苷的生物合成中,前体物质为2,3,22,23-双环氧角鲨烯.该文为了挖掘罗汉果中特有的鲨烯环氧酶基因,克隆了SgSQE1和SgSQE2基因,对其进行保守域、跨膜域等生物信息学分析,实时荧光定量PCR分析其表达模式,并在原核中异源表达,最后通过分子对接预测蛋白和底物之间是否存在相互作用,为甜苷合成中的鲨烯环氧酶基因功能研究提供依据.SgSQE1和SgSQE2基因均编码524个氨基酸,序列一致性为84％,但在N末端有较高的特异性.原核表达的融合蛋白为无活性的包涵体,这一现象可能由于跨膜结构引起.二者在果实中均有表达,SgSQE2表达较为稳定,而SgSQE1在15 d表达丰度最高,与葫芦二烯醇合酶(cucurbitadienol synthase)具有完全一致的共表达模式.分子对接结果中SgSQE1和SgSQE2蛋白均能与配基2,3-氧化角鲨烯相互作用,作用位点为紧邻的氨基酸残基(R348,H349).结果表明二者在罗汉果次生代谢产物合成中起鲨烯环氧酶的功能,推测SgSQE1更可能参与了甜苷的生物合成,SgSQE2在其他葫芦烷型化合物或植物甾醇中发挥作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马小军		129	1559	21.0	32.0
2	唐其	湖南农业大学湖南省植物功能成分利用协同创新中心	18	51	4.0	6.0