罗汉果 SgHMGR 基因的克隆、分析及原核表达

• 作者: 唐其 白隆华 莫长明 赵欢 马小军
• 来源期刊: 广西植物
• 学科: 生物学
• 关键词: 罗汉果 3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶 A 还原酶 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 罗汉果专题论文
• 页码范围: 796-801,791
• 页数: 7页
• 分类号: Q943.2
• 字数: 4192字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11931/guihaia.gxzw201403023

摘要

罗汉果甜苷 V 是一种葫芦烷型四环三萜类物质,作为主要的活性成分和甜味成分存在于成熟果实中,3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶 A 还原酶(HMGR )作为萜类化合物生物合成途径中的第一个限速酶,位于甲羟戊酸(MVA)途径中,是罗汉果甜苷 V 生物合成途径中的重要调控位点。为了深入了解罗汉果甜苷 V 的生物合成途径,该研究从罗汉果转录组数据中获得一条编码 HMGR 的 unigene,以授粉后3 d 的幼果作为实验材料,通过 RACE 技术获得了1926 bp 的全长序列,经过生物信息学软件分析,发现该基因含有1749 bp的开放阅读框,编码582氨基酸残基,含2段跨膜区,分别位于50~72 aa 和93~115 aa,亚细胞定位预测位于质膜或内质网上,预测该蛋白没有信号肽,系统进化树分析显示与同科植物黄瓜和甜瓜中 HMGR 基因的同源性最高。该研究采取去掉 N 端跨膜区的方法,构建原核表达载体转化大肠杆菌 BL21(DE3),经 IPTG 诱导在上清和沉淀中均有融合蛋白出现,尤其在25℃诱导过夜后上清中表达最明显。该文是首次对 Sg HMGR基因全长序列的克隆及原核表达的功能验证,为进一步深化 Sg HMGR 基因在罗汉果甜苷 V 生物合成途径中的功能及分子调控研究打下基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马小军	中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所	129	1559	21.0	32.0
2	赵欢	中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所	5	38	4.0	5.0
3	唐其	湖南农业大学园艺园林学院	18	51	4.0	6.0