MiR-301b抑制转录因子Klf4影响肝癌细胞迁移

• 作者: 刘传 宋卫峰 李琦 王凡 董笑
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: MicroRNA-301b Klf4 肝细胞癌 迁移
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1806-1811
• 页数: 6页
• 分类号: R-33|R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2018.10.002

摘要

目的:探讨miR-301b对肝癌细胞迁移能力的影响及其分子机制,为肝癌的分子靶向治疗研究提供新线索.方法:体外培养人肝癌细胞株SK-Hep-1、HCC-LM3和人永生化肝细胞株L02,采用RT-PCR方法检测miR-301b表达.通过生物信息学软件Targetscan及miRanda预测miR-301b的靶基因,筛选出转录因子Klf4基因为miR-301b的下游靶基因,通过双荧光素酶报告基因实验和Western Blot实验证明其调控作用.通过划痕和Transwell实验探究miR-301b靶向Klf4基因对肝癌细胞迁移性的影响,Western Blot检测miR-301b对上皮间质转化标记物E-cadherin、N-cadherin蛋白表达的影响.结果:与正常肝细胞相比,肝癌细胞株中miR-301b表达水平明显升高.瞬时转染miR-301bmimic后,实验组miR-301b的表达显著高于对照组;瞬时转染miR-30 lb inhibitor后,实验组miR-301b的表达显著低于对照组.双荧光素酶报告基因实验显示:miR-301b直接作用于Klf4基因的3'UTR区,并下调Klf4蛋白的表达,与软件预测结果相符合.划痕实验及Transwell迁移实验显示:miR-301b通过下调Klf4基因,促进肝癌细胞的迁移.进一步实验显示:过表达miR-301b显著下调E-cadherin的表达,而上调N-cadherin的表达.结论:miR-301b在肝癌细胞SK-Hep-1、HCC-LM3中高表达,可能通过抑制靶基因Klf4的表达,促进肝癌的迁移,miR-301b可能参与了肝癌细胞的上皮间质转化过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李琦	上海交通大学附属第一人民医院肿瘤中心	42	232	9.0	14.0
2	王凡	上海交通大学附属第一人民医院肿瘤中心	15	20	2.0	4.0
3	董笑	上海交通大学附属第一人民医院肿瘤中心	3	5	2.0	2.0
4	宋卫峰	上海交通大学附属第一人民医院肿瘤中心	16	130	7.0	11.0
5	刘传	上海交通大学附属第一人民医院肿瘤中心	2	6	1.0	2.0