人源CerS2重组腺病毒构建及其对肝癌细胞HepG2细胞周期的作用

• 作者: 向加林 杨小理 杨艳 欧阳旭红 王凤学 钱玥
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 神经酰胺合酶 重组腺病毒 细胞周期 p27 激光扫描共聚焦显微镜
• 年，卷（期）: 2018,（31）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 3978-3981,3986
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3380字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2018.31.004

摘要

目的 探讨神经酰胺合酶2(CerS2)过表达对肝癌细胞HepG2细胞周期的影响及可能机制.方法 化学合成人源CerS2基因CDS区并构建重组穿梭质粒pDC315-CerS2-绿色荧光蛋白(GFP),采用Admax系统将成功构建的CerS2重组穿梭质粒与骨架质粒共转染HEK293细胞,通过Cre/loxP实现重组,并进行扩增、纯化及滴度测定.将正确构建的Adv-CerS2-GFP重组腺病毒与空载分别感染肝癌细胞HepG2(即对照组、空载组、实验组),激光共聚焦显微镜定位CerS2-GFP融合蛋白的表达,流式细胞术PI法检测各组细胞周期的分布;RT-qPCR、Western blot法检测各组细胞CerS2、p27mRNA及蛋白表达水平.结果 经测序分析验证重组腺病毒构建成功.HepG2实验组CerS2、p27mRNA、蛋白相对表达水平较对照组、空载组明显增加(P＜0.01).对照组与空载组细胞周期时相分布差异无统计学意义(P＞0.05),实验组细胞较对照组、空载组G0/G1期百分比明显增加(P＜0.01);G2/M、S期明显减少(P＜0.01).结论 成功构建人源CerS2重组腺病毒且过表达的CerS2导致肝癌细胞HepG2细胞周期G0/G1期阻滞,其机制可能是通过上调p27从而抑制肝癌细胞的生长与增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨艳	遵义医学院附属医院医学检验科	73	199	7.0	9.0
2	欧阳旭红	遵义医学院附属医院医学检验科	27	81	5.0	7.0
3	向加林	遵义医学院附属医院医学检验科	24	75	5.0	7.0
4	杨小理	遵义医学院附属医院医学检验科	9	20	3.0	3.0
5	钱玥	遵义医学院检验医学院	1	0	0.0	0.0
6	王凤学	贵州省遵义市第一人民医院检验科	4	11	2.0	3.0